丁香园|丁香通|人才|会议|药学|博客欢迎您!predator管理被过滤广告首页供应信息求购信息商家黄页业内资讯实验方法合作招商产品分类：试剂技术服务耗材实验室仪器/设备医用设备书籍软件辅料原料药中间体您现在的位置：首页>实验技术方法>细胞技术>细胞周期/增殖/凋亡检测请输入您点击次数：1711作者：广州市锐博生物科技有限公司发表于：2009-11-0216:44转载请注明来自丁香园来源：广州市锐博生物科技有限公司细胞增殖检测新技术——EdU取代BrdU直接测定DNA合成是细胞增殖检测的最准确方法之一，是测定物质毒性、评估药物安全评价、细胞健康的基本方法，其中以前常用的方式是利用胸腺嘧啶核苷酸类似物——BrdU进行检测。因为在细胞周期的S期，和细胞一起孵育的BrdU能渗入DNA分子中，再结合BrdU抗体与渗入DNA的BrdU特异性结合，就能够检测到DNA复制活跃的细胞。但BrdU有一大缺点，就是需要变性DNA后才能与抗体结合，但这就破坏了DNA双链结构，影响了其他染料的结合染色，导致染色弥散，准确性降低等问题。哈佛大学医学院细胞生物学家AdrianSalic就认为：“为了能够暴露BrdU的抗原表位，必须用高浓度的盐酸，乙酸或酶解，但经历了如此严重的处理后，细胞原本精巧细致的结构在显微镜下就变得惨不忍睹了。”事实上，现在有一种新的检测方法能避免这种情况的发生——EdU检测。EdU（5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷）也是一种胸腺嘧啶核苷类似物，但其连有的炔羟基团在天然化合物中很少见，在细胞增殖时能够插入正在复制的DNA分子中，基于EdU与染料的共轭反应可以进行高效快速的细胞增殖检测分析，可以有效地检测处于S期的细胞百分数。与传统的免疫荧光染色（BrdU）检测方法相比，更简单，更快速，更准确。EdU只有BrdU抗体大小的1/500，在细胞内更容易扩散，不需要严格的样品变性（酸解、热解、酶解）处理，有效地避免了样品损伤，有助于在组织、器官的整体水平上观测细胞增殖的真实情况，具有更高的灵敏度和更快的检测速度。AdrianSalic特别强调：“与传统的免疫荧光染色不同，EdU反应能在几分钟内完成，且不需要进行严格的样品变性处理，使得组织成像更简单易行。”细胞增殖检测方法基于EdU与Apollo？荧光染料的完美结合准确检测新合成的DNA，简单，快速，准确。这种检测方法非常快速，且只需简单的几个步骤，因此也适用于高通量筛选试验，如在药物筛选中检测加药后细胞的活力。页码，1/3细胞增殖检测新技术——EdU取代BrdU_细胞周期/增殖/凋亡检测_丁香通_...
