中国体视学与图像分析2014年第19卷第1期84CHINESEJOUＲNALOFSTEＲEOLOGYANDIMAGEANALYSISVol．19No．1March2014文章编号:1007－1482(2014)01－0084－0090·生物医学·DOI:10.13505/j.1007-1482.2014.19.01.135种血浆游离DNA提取方法的比较杨麒巍1，杜珍武1，赵冠杰1，于杉1，张琳1，李秀英1，白金萍2，刘颖男1，张桂珍1(1.吉林大学中日联谊医院中心研究室，长春130033;2吉林大学基础医学院病理学教研室，长春130021)摘要:目的分别应用5种方法进行血浆游离DNA的提取，从而判定与筛选最佳的血浆cfDNA提取方法。方法采集19例健康人血浆标本，针对每一样本取350μl血浆分别应用经1次/2次酚－氯仿－异戊醇抽提法，经1次/2次酚－氯仿－异戊醇抽提配合微量DNA助沉剂法和介孔纳米磁珠法5种方法进行cfDNA提取，应用紫外分光法测定提取cfDNA的含量与纯度，应用实时荧光定量PCＲ方法以提取血浆cfDNA为模板进行扩增反应，以验证提取效果。结果应用5种方法从19例350μl血浆样本中提取的血浆cfDNA含量分别为(6971.43±1934.40)ng/ml、(2196.86±823.94)ng/ml、(12397.14±4197.37)ng/ml、(5568.29±1618.17)ng/ml和(7458.57±3706.83)ng/ml，A260/A280值分别为0.93±0.07、1.09±0.12、1.15±0.05、1.16±0.12和0.89±0.19，ＲT-qPCＲ扩增成功率为100%。结论经1次酚－氯仿－异戊醇配合微量DNA助沉剂法提取量大，纯度高，所提取的血浆cfDNA可以为ＲT-qPCＲ提供模板，进行后续实验。关键词:血浆游离DNA;酚－氯仿－异戊醇;DNA助沉剂;介孔纳米磁;实时荧光定量PCＲ中图分类号:Ｒ446.11文献标识码:A收稿日期:2014-12-05基金项目:吉林省科技厅重大项目(20130727038YY);吉林省科技厅项目(20100942);吉林省科技厅项目(20110740);吉林省发改委项目(20101928)作者简介:杨麒巍(1987－)，男(汉族)，吉林省公主岭市人，医学博士。研究方向:分子诊断学。通信作者:张桂珍，教授。E-mail:zhangguizhenjlu@163．comComparisonoffivemethodsofplasmaDNAextractionYANGQiwei1，DUZhenwu1，ZHAOGuanjie1，YUShan1，ZHANGLin1，LIXiuying1，BAIJinping2，LIUYingnan1，ZHANGGuizhen1(1.CentralLaboratory，China－JapanUnionHospital，JilinUniversity，Changchun130033，China;2.DepartmentofPathology，CollegeofBasicMedicalSciences，JilinUniversity，Changchun130021，China)2014年第19卷第1期杨麒巍等:5种血浆游离DNA提取方法的比较85Abstract:ObjectiveToscreenanoptimalmethodo...
