063CARCINOGENESIS,TERATOGENESIS&MUTAGENESIS综述癌变畸变突变2023年1月第35卷第1期肿瘤干细胞培养与分选鉴定的研究进展郭德志1,张建鹏2,*(1.海军军医大学基础医学院学员三大队八队,上海200433;2.海军军医大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,上海200433)收稿日期:2022-07-06;修订日期:2022-10-14基金项目:国家重点研发计划项目(2019YFC0312504)作者信息:郭德志,E-mail:1301614959@qq.com。*通信作者,张建鹏,E-mail:13636370411@163.com【摘要】肿瘤干细胞(CSCs)是肿瘤细胞中一群拥有自我更新能力的细胞,并且被认为是肿瘤异质性的根本原因。此外,CSCs被认为是肿瘤转移性传播和治疗耐药性的主要驱动因素。深入研究CSCs的表面标志物、信号转导途径、微环境、代谢模式等,有利于靶向CSCs治疗策略的研发和临床肿瘤治疗。因而,本文简述了CSCs的一些常用培养和分选鉴定方法及其原理,并对各类方法进行了总结和对比。【关键词】肿瘤干细胞;细胞培养;细胞分选;细胞鉴定中图分类号:R34文献标志码:A文章编号:1004-616X(2023)01-0063-05doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2023.01.012近10年来恶性肿瘤的发病率保持每年约3.9%的增幅,死亡率保持每年2.5%的增幅,引起了人们的高度重视[1]。对于多数恶性肿瘤而言,外科治疗、放射治疗、化学治疗、靶向治疗以及免疫治疗等方法可以杀死患者体内的大部分肿瘤细胞,却难以从根本上治愈癌症。这一现象可以用肿瘤干细胞(cancerstemcells,CSCs)理论加以解释。CSCs具有自我更新、无限增殖和抗化学毒物损伤的能力,与肿瘤细胞的生长、转移和复发有着极为密切的关系。CSCs有5个独立的鉴定标准,包括自我更新能力,占总肿瘤种群的小部分,可复制的肿瘤表型,向非致瘤细胞的多潜能分化能力,以及独特的细胞表面抗原表型[2]。近年来,CSCs在各种肿瘤中不断被发现,例如前列腺癌、肝癌、肺癌、结肠癌、胰腺癌等。对CSCs的研究和靶向疗法的尝试,均印证了该学说[3-7]。如果能从肿瘤细胞中分离、培养CSCs,建立可靠的肿瘤模型,则有助于揭示CSCs的功能特性和肿瘤发生机制,进而靶向消除干细胞样肿瘤细胞群,将有望成为治疗恶性肿瘤的有效策略之一。因此,本文主要对CSCs的常用培养和分选鉴定方法及其原理进行综述,并对各类方法进行总结和对比。1CSCs的培养方法1.1非黏附培养系统非黏附培养系统是将细胞系培养在具有非黏附表面的培养塑料制品中。一般采用在培养皿上涂覆琼脂糖薄膜的方式使细胞...