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猪圆环病毒诊断方法研究进展_任慧波.pdfVIP免费

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HunanAnimalScienceandVeterinaryMedicine,No.6,2022.(TotalNo.232)2022年第6期(总第232期)专论与综述猪圆环病毒(porcinecircovirus,PCV)为无囊膜,呈正二十面体,直径大小约为13~25nm,其DNA基因组为环状单股负链的病毒,被列为圆环病毒科圆环病毒属,是目前已知的最小病毒之一。人们根据猪圆环病毒(PCV)致病性和抗原特异性存在差异的特点,将其划分为4种基因型,主要为2型导致猪发病。PCV2主要感染宿主是猪,发病猪和无症状的隐性感染猪是主要传染源,感染途径主要是通过口鼻直接接触带毒的粪便、尿液或接触已感染PCV2的病猪[1-2]等水平传播方式感染其他健康猪群。PCV2同时也具有垂直传播的特性,在流产的胎儿、胎盘以及精液中均能检测到PCV2[3-4]。饲养环境卫生不合格、饲养管理不达标、引种不当、免疫性疾病混合感染等因素是诱发本病的原因[5-6]。猪圆环病毒2型主要是侵害猪只的免疫系统,使感染猪只的免疫功能受到损害,进而导致机体免疫抑制,诱发更多的相关疾病,且混合感染较多,该病毒通常以亚临床感染的形式出现而容易被忽视,为了更好地控制猪圆环病毒的感染和传播,迫切需要一些适合的快速准确的诊断方法应用于临床。但目前在诊断过程中,单一的诊断方法往往不能精准地诊断出该病,需要根据各种检测猪圆环病毒的方法及其优缺点进行结合分析并优化检测手段,为快速诊断该病及发展新型的诊断方法提供参考。1PCV2病毒分离鉴定病毒分离是PCV2常用的诊断技术。伊秀凤等[7]将患有PMWS(断奶仔猪多系统衰竭综合征)猪的腹股沟淋巴结、肾脏等组织研磨,经生理盐水稀释、冻融、离心、取上清过滤等步骤,然后利用PCR方法鉴定为PCV2阳性,再取分离液接种于PK-15细胞悬浮液中,经37℃培养,在悬浮液中形成细胞单层后,弃去生长液,将其加入D-氨基葡萄糖中处理,再将其置入新生仔猪血清的DMEM维持液培养48h后成功获得病毒,将获得的病毒放置在电子显微镜下可观察到无囊膜、呈正二十面体并呈散在分布的病毒粒子,即为PCV2病毒粒子。PCV2病毒分离存在分离步骤多、费时、费力等不便,不适用于临床上快速检测与诊断。2免疫组化免疫组化又称免疫细胞化学技术(immunohisto-chemistry,IHC),该技术是运用抗原抗体的特异性反应的特征,用单克隆抗体或多克隆抗体在石蜡组织切片中检测某种抗原或抗体的分布情况,同时也用于抗原、抗体的定性、定量、定位的研究。该方法除了作为定性、定量检测的一种手段,可以利用定位病原在组织内的动态分布的特...

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