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猪源唾液酸黏附素受体的表达及其纳米抗体筛选_洪伟鸣.pdfVIP免费

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■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■[25]黄强,文超良,孙从佼,等.鸡肠道微生物组成及其影响因素[J].中国家禽,2021,43(8):96-105.[26]王晶,戴东,武书庚,等.鸡肠道微生物演替与早期定植的研究进展[J].生物技术通报,2020,36(2):1-8.[27]黄永平,魏学强,马煜辉,等.乳杆菌属在抗细菌生物膜相关感染中的研究进展[J].重庆医学,2020,49(10):1697-1701.[28]李仲兴,王秀华,赵建宏,等.用M—H琼脂进行五味子、白芍对252株临床菌株的体外抗菌效果观察[J].中医药研究,2000(4):44-46.[29]马廉兰,李娟,刘志春,等.五味子等中草药对肠道致病菌和条件致病菌的抗菌作用[J].赣南医学院学报,2003,23(3):241-244.[30]袁昌衡,周启贵,杨飞,等.80种中药水煎液对淋球菌的抑制试验[J].中国医院药学杂志,1997,17(11):508-509.[31]李平兰,时向东,吕燕妮,等.常见中草药对两种肠道有益菌体外生长的影响[J].中国农业大学学报,2003,8(5):33-36.洪伟鸣,郭子杰,李睿婷,等.猪源唾液酸黏附素受体的表达及其纳米抗体筛选[J].江苏农业科学,2023,51(4):186-190.doi:10.15889/j.issn.1002-1302.2023.04.027猪源唾液酸黏附素受体的表达及其纳米抗体筛选洪伟鸣,郭子杰,李睿婷,李玲,徐海,张亮,宋亮(江苏农牧科技职业学院,江苏泰州225300)摘要:为制备特异性结合猪源Sn受体的纳米抗体分子,采用人工合成猪肺泡巨噬细胞Sn受体胞外区(Sn4D)基因序列,将其克隆至pET-30a载体中,并在大肠杆菌中诱导表达Sn4D蛋白;经Ni柱纯化的Sn4D蛋白作为靶标分子,在T7噬菌体展示的纳米抗体文库中进行3轮亲和筛选;然后从筛选产物中挑选单抗克隆噬菌体进行亲和力、特异性鉴定。结果显示,成功构建了pET-30a-Sn4D重组表达载体,并诱导表达出约50ku的目标蛋白,Western-blot显示该蛋白具有良好的反应活性;经过3轮亲和筛选,投入产出比逐渐升高,并从筛选产物中鉴定出6株特异性结合Sn4D的纳米抗体分子。该纳米抗体分子的获得为今后进一步开展抗病毒活性的研究奠定了良好基础。关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒;Sn受体;纳米抗体;亲和筛选中图分类号:S852.4文献标志码:A文章编号:1002-1302(2023)04-0186-05收稿日期:2022-05-07基金项目:江苏省高等学校大学生创新创业训练计划(编号:202112806010Y)。作者简介:洪伟鸣(1981—),男,江...

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