质网途径[11]。在线粒体调节通路中Bcl-2蛋白家族是重要的调节因子,可分为凋亡抑制蛋白和促凋亡蛋白两大类。Bcl-2和Bax分别是Bcl-2蛋白家族中典型的凋亡抑制蛋白和促细胞凋亡蛋白,两者的比值(Bax/Bcl-2)成为“凋亡开关”[12],决定细胞是否进入凋亡状态。在线粒体调节途径中,线粒体细胞色素C(Cyt-C)释放到胞质中,与Caspase-9形成凋亡小体,使Caspase-9前体(ProCaspase-9)被催化形成有活性的Caspase-9,继而被激活的Caspase-9激活效应酶Caspase-3,最终诱导凋亡[13]。此外,p53作为重要的细胞凋亡调控蛋白,可通过上调Bax的表达及下调Bcl-2的表达共同完成促进细胞凋亡的作用,同时还可促进周期蛋白依赖性激酶抑制因子的表达引起细胞G1期阻滞[11]。本实验通过蛋白免疫印迹法检测HepG-2细胞中上述的凋亡相关蛋白的表达情况,结果显示,FIO作用于HepG-2细胞后,线粒体介导的凋亡通路所涉及的一系列信号分子出现浓度依赖性的明显变化,即促凋亡蛋白p53和Bax的表达增加、凋亡抑制蛋白Bcl-2的达减少、线粒体内凋亡因子Cyt-C的表达增加、线粒体通路下游的Caspase-9和Caspase-3被剪切活化。这些结果表明,线粒体通路可能参与调节FIO诱导HepG-2细胞凋亡的作用。综上所述,发酵的桦褐孔菌(FIO)对人肝癌HepG-2细胞具有显著的增殖抑制和诱导凋亡的作用,且线粒体介导的凋亡通路可能参与其中,但FIO对其他凋亡途径的作用及机制有待于进一步研究。参考文献:[1]李青.桦褐孔菌多糖的提取、纯化及其抗肿瘤活性研究[D].青岛科技大学硕士学位论文,2014.[2]戚月婷,玄光善.桦褐孔菌总三萜提取工艺的研究[J].应用化工,2015,44(5):924,932.[3]ZhongXH,WangLB,SunDZ.Effectsofinotodiolextractsfrominono⁃tusobliquusonproliferationcycleandapoptoticgeneofhumanlungade⁃nocarcinomacelllineA549[J].ChinJIntegrMed,2011,17(3):218.[4]LiWZ,XiuHZ,SuYY,etal.Inotodiolinhabit...