陈庆(红色部分)、潘丽莎(绿色部分)、修雯靖(绿色部分)、於则(紫色部分)不光要抄实验过程,还需要实验结果!!!表格自己画,图片需打印出来黏贴上去。。。2014-07-11细胞培养实验准备【实验目的】熟悉细胞培养所需试剂的配置及其用途,熟悉各种仪器的操作。【实验准备内容】一、器械的清洗和消毒1.玻璃器皿:1)将器皿用清水刷洗干净。2)泡入铬酸洗液,12小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗半小时左右,再用蒸馏水冲洗2次,超纯水冲洗2次。3)将处理好的器皿烘干后用牛皮纸包装好,装入高压锅内,盖好盖子,打开开关和安全阀,当蒸气成直线上升时,关闭安全阀,当指针指向15磅时,维持15分钟。4)待压力降至0后,取出,烤箱内烘干备用。2.塑料制品:将EP管、15mL离心管、50mL离心管、冻存管等放入铝制盒内,各种规格枪头均装盒,高压锅15磅高压15分钟,烘干后备用。二、试剂配制(1)PBS缓冲液:NaCl8.0g,KCl0.2g,Na2HPO4•12H2O1.56g,KH2PO40.2g,倒入盛有超纯水的烧杯中,玻璃棒搅动,充分溶解,然后把溶液倒入容量瓶中准确定容至1000mL,摇匀,将溶液倒入试剂瓶内,盖上盖子,放入高压锅内121℃消毒15分钟。(2)含10%胎牛血清的1640培养基配制:在超净台吸取50mL胎牛血清,加入450mL1640培养液(购自GIBCO公司),加入青链霉素溶液至终浓度1%,混匀分装后,4℃保存待用。2014-07-12人脐静脉内皮细胞复苏【实验目的】掌握细胞复苏的原理和操作技能,继续强化无菌操作理念,为进一步细胞实验打好基础。【实验原理】冻存细胞要进行复苏,再培养传代。复苏细胞一般采用快速融化法,将冻存在液氮中的细胞快速融化至37℃,以保证细胞外结晶快速融化,避免慢速融化水分渗入细胞内,再次形成胞内结晶损伤细胞。【实验仪器、试剂和材料】1.实验仪器:常规细胞培养仪器设备、恒温水浴振荡器、离心机、CO2培养箱。2.实验试剂和材料:PBS溶液、10%胎牛血清1640培养液。冻存的人脐静脉内皮细胞。【实验步骤】1.将水浴锅预热至37℃。用75%酒精擦拭经紫外线照射30min的超净工作台台面。在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、培养瓶等。2.从液氮保存灌中取出冻存管,迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻,并不断的摇动,使管中的液体迅速融化。3.约2min后管内液体完全溶化,取出后置冰浴中。4.将液体转至15mL离心管,加入2mL培养液,放入离心机中1000r/min离心5min。5.弃上清,向管内加入2mL培养液,吹打制成细胞悬液。6.重复步骤...