第十二第一节概述一、免疫测定分类二、免疫测定原理三、固相免疫测定四、固相膜的特点五、常用的固相膜六、固相膜的技术要求第十二章固相膜免疫测定第二节免疫金标记技术一、胶体金的制备第三节膜载体免疫测定的种类与原理一、膜固相免疫测定的特点二、固相微孔膜测定种类三、免疫渗滤试验和免疫层析试验四、酶联免疫斑点试验五、免疫印迹六、放射免疫沉淀试验思考题小结随着免疫学技术和相关生物化学技术的发展，检测方法上派生出了多种类型的固相膜免疫快速检测试验。该类试验的最大特点是不需要大型设备，对检测人员稍加培训即能掌握操作要求和判定标准。第一节概述标记免疫测定放射免疫测定1960’酶免疫测定1970’荧光免疫测定1980’－1990’化学发光免疫测定1990’－膜固相免疫测定1990’－一、免疫测定分类免疫浊度测定Ag+AbAgAb+Ab标记免疫测定Ag+Ab*AgAb*+Ab*（B）（F）二、免疫测定原理利用抗原抗体反应检测标本中微量物质抗原+抗体抗原抗体复合物Ag+AbAg*Ab三、固相免疫测定B与F分离Ab*Ab*Ag+Ag+Ab*AbAb四、固相膜的特点多孔性毛细管作用非共价键高度吸附抗体或抗原高度敏感性易于漂洗操作简便五、常用的固相膜玻璃纤维素(fiberglass)膜尼龙(nylon)膜聚偏氟乙稀(polyvinylidenefluoride，PVDF)膜硝酸纤维素（nitrocellulose，NC）膜六、固相膜的技术要求孔径：0.2~0.6μm流速：以ml/cm2/min表示蛋白质结合力：吸附力很强，以μg/cm2表示均一性固相NC膜第二节免疫金标记技术免疫金标记技术(Immunogoldlabellingtechique)主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性，在金标蛋白结合处，在显微镜下可见黑褐色颗粒，当这些标记物在相应的配体处大量聚集时，肉眼可见红色或粉红色斑点，因而用于定性或半定量的快速免疫检测。这一反应也可以通过银颗粒的沉积被放大，称之为免疫金银染色（immunogoldsilverstaining，IGSS）。一、胶体金制备胶体金（colloidalgold）的制备一般采用还原法，常用的还原剂有柠檬酸钠、鞣酸、抗坏血酸、白磷、硼氢化钠等。向一定浓度的金溶液内加入一定量的还原剂使金离子还原成金原子，形成金颗粒悬液，也称金溶胶（goldsolution）。胶体金的制备及特性胶体金粒径1%柠檬酸钠加入量胶体金特性（nm)（ml)*呈色lmax(nm)162.00橙色51824.51.50橙红色522411.00红色52571.50.70紫色535*还原100ml0.01%HAuCl4所需量胶体金（ColloidalGold）15~60nm优质劣质胶体金结合物（Conjugate）膜固相免疫测定的特点第三节...
