浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛实验记录序号：31实验时间：8月10日8:30－20:30请勿透露学校、教师和个人信息大鼠心肌组织总RNA提取预实验结果【实验结果】本次试验通过ND2000检测提取的大鼠心肌组织总RNA浓度及纯度，纯度通过OD260/OD280比值是否在2.0左右衡量，具体如表1所示表1大鼠心肌组织RNA浓度【实验讨论】实验过程中发现组织在研磨过程中会越研磨越少。考虑可能是因为，在研磨前，组织块没有剪碎，使得加入液氮后，组织块凝结为较大的颗粒状，在研磨时易发生飞溅。在研磨时，组织块较硬，用力过猛也会使组织块飞溅，故在研磨时应注意力道。另外，Trizol应在液氮快挥发干时及时加入。检测RNA溶液的吸光度280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景（溶液浑浊度）、盐浓度和蛋白等有机物的值。一般的，我们只看OD260/OD280（Ratio，R）。1.8~2.0时，认为RNA中蛋白或者时其他有机物的污染是可以容忍的。当R>2.2时，说明RNA已经水解成单核酸。本实验结果可以看出R值均在1.8~2.0之间，因此，认为此次抽提RNA较为成功。【注意事项】1.研钵在使用前应充分预冷，研磨过程中，边研磨边加入液氮，不能使液氮挥发干2.一次研磨的组织块应控制在0.3g左右，不宜过多3.Trizol量不可过少，过少会导致抽提的RNA中有较多的基因组DNA污染4.离心机在使用前应充分预冷；使用时，高速离心（高于3000rpm）时必须严格配平（各离心管须重量相当）；所有实验做完后，须打开机盖，待机器恢复室温后才可关闭。5.吸取500µl上清液时应使用100µl移液器分次逐渐的吸取，且吸取速度要慢，防止吸入下层物质；6.实验过程中操作人员须佩戴手套、口罩，防止RNA降解7.实验开始前，须用棉花蘸取酒精擦拭操作台面组别RNA浓度ng/ulA260A280260/280260/230大鼠心肌组织（心房）403.209.565.141.861.23405.409.665.181.861.34
