9植物细胞培养植物细胞培养是指将植物单细胞或细胞团进行培养，形成单细胞无性系或再生植株的技术。9.1单细胞培养植物单细胞培养是指将植物单细胞进行培养，形成单细胞无性系或再生植株的技术。9.1.1单细胞的分离1.机械分离：研磨、过滤、离心2.酶解分离：利用果胶酶分解细胞间的胞间层，使其分散。3.由愈伤组织分离：液体培养、振荡、过滤、离心9.1.2单细胞培养方法1.平板培养法2.看护培养法3.微室培养法4.纸桥培养法细胞平板培养平板培养（platingculture)是指将一定密度的悬浮细胞接种到一薄层固体培养基中培养的技术。单细胞分离：一般采用酶分离法，小细胞团不能超过6个细胞，要选择合适的过滤网筛。单细胞悬浮液的制备：1×105/ml植板：将1份已调整好密度的单细胞悬液与4份35℃的固体培养基充分混合均匀，然后均匀的平铺与培养皿中，厚度1mm左右。看护培养看护培养（nurseculture）Muir等1954年设计。Vesselfornursecultures看护培养双层滤纸培养微室培养Filterpaperbridges纸桥培养9.2悬浮培养悬浮培养是将游离细胞或细胞团按一定密度，悬浮在液体培养基中不断地搅拌或振荡进行培养的技术。可以使培养细胞快速大量增殖。双子叶植物比单子叶植物更容易建立悬浮培养。大多数建立悬浮培养的方法要求首先在离体条件下获得愈伤组织。CallusinductionSuspensioninitiation悬浮培养很少只由单细胞组成。大多数除了单独游离的细胞外，都有细胞团。建立了悬浮培养后，需要结合过滤，进行反复继代培养，以降低细胞团的大小。细胞团中的细胞与单独游离的细胞其微环境是不同的。Atypicalaggregateofsmall,viable,isodiametriccellsofashootcellsuspensioncultureofErythrinawhichoccursinthetheexponentialandlineargrowthphasesAfilamentouscellofashootcellsuspensionofErythrinaAfilamentousseptatedcellofashootcellsuspensionofErythrinadividingactivelyatoneendtoformanaggregateAgiantfilamentouscell(G)inashootcellsuspensionofErythrina.Notethediffernceinthesizebetweenthegiantcell,thesmallergenerallyoccurringfilamentiouscellsandtheAgiant(G)andnormal(N)isodiametriccellinashootcellsuspensioncultureofErythrina.9.2.1培养方法1.分批培养2.半连续培养3.连续培养1.分批培养分批培养是指将一定量的细胞或细胞团分散在一定量的液体培养基中进行培养。特点：只有气体内外有交换。必须及时继代培养，约稀释5倍。悬浮细胞生长S形曲线：...
