第三章基因工程载体第三章基因工程载体§1§1概述概述§2§2克隆载体克隆载体§3§3大肠杆菌表达大肠杆菌表达载体载体第一节概述第一节概述载体（载体（vectorvector）是指将外源）是指将外源DNADNA或基因携带进入或基因携带进入宿主细胞进行扩增或表达的工具。宿主细胞进行扩增或表达的工具。按功能按功能::克隆载体和表达载体，表达载体又分胞内克隆载体和表达载体，表达载体又分胞内表达和分泌表达载体。表达和分泌表达载体。克隆载体（cloningvector）：主要是对目的基因克隆，建立DNA文库和cDNA文库，其上有复制子即可；表达载体（expressionvector）：能使目的基因在宿主细胞中表达的一类载体。这类载体既有复制子，更要有强启动子；按工作方式按工作方式::质粒载体、噬菌体载体、粘粒质粒载体、噬菌体载体、粘粒载体、人工染色体载体等。载体、人工染色体载体等。按受体细胞按受体细胞::原核细胞载体和真核细胞载体。原核细胞载体和真核细胞载体。第二节克隆载体第二节克隆载体克隆载体克隆载体(cloningvector)(cloningvector)：：是指用于扩增是指用于扩增或保存外源或保存外源DNADNA片段而设计的载体。片段而设计的载体。克隆载体的结构特征克隆载体的结构特征多克隆位点多克隆位点(multiplecloningsite)(multiplecloningsite)oriori复制起始点复制起始点遗传标记遗传标记pUCpUCMCMCSSAmpAmprr克隆载体具备的条件克隆载体具备的条件①①载体都能携带外源载体都能携带外源DNADNA片段片段((基因基因))进入受体细进入受体细胞，或停留在细胞质中自我复制，或整合到染色胞，或停留在细胞质中自我复制，或整合到染色体体DNADNA上，随着染色体上，随着染色体DNADNA的复制而同步复制的复制而同步复制。。②②载体都具有供外源基因插入的限制性核酸内切酶载体都具有供外源基因插入的限制性核酸内切酶位点，即多克隆位点位点，即多克隆位点。。③③载体都具有合适的遗传标记基因载体都具有合适的遗传标记基因。。④④载体都必须是安全的，不应含有对受体细胞有害载体都必须是安全的，不应含有对受体细胞有害的基因，并且不会任意转入除受体细胞以外的其的基因，并且不会任意转入除受体细胞以外的其他生物细胞，尤其是人的细胞。他生物细胞，尤其是人的细胞。⑤⑤载体本身的分子量都比较小，可容纳较大的外源载体本身的分子量都比较小，可容纳较大的外源基因片段。基因片段。⑥⑥载体在细胞内的拷贝数要高，方便外源基因在细载体在细胞内的拷贝数要...
