·论著·文章编号：１００７⁃８７３８（２０２２）１１⁃１００５⁃０６沉默环状ＲＮＡ＿胚胎致死异常视觉样蛋白２（ｃｉｒｃＥＬＡＶＬ２）抑制小鼠睾丸ＴＭ４支持细胞增殖并促进其凋亡史圣甲１，２，季兴哲１，孙建华１∗，张洲１（１西北妇女儿童医院生殖中心，陕西西安７１０００３；２空军军医大学基础医学院免疫学教研室，陕西西安７１００３２）■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■收稿日期：２０２２⁃０４⁃２６；接受日期：２０２２⁃０８⁃２６基金项目：陕西省卫健委卫生健康科研基金（２０２１Ｅ０２４）；西安市科技计划项目（ＸＡ２０２１⁃ＹＸＹＪ⁃０１０４）作者简介：史圣甲（１９８７－），男，黑龙江哈尔滨人，主治医师，博士Ｔｅｌ：１８９６６８７０１７１；Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｓｈｉｓｈｅｎｇｊｉａ＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ∗通讯作者，孙建华，Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｓｕｎ３１０３１２３０２４＠１２６．ｃｏｍ［摘要］目的观测沉默环状ＲＮＡ＿胚胎致死异常视觉样蛋白２（ｃｉｒｃＥＬＡＶＬ２）对小鼠睾丸ＴＭ４支持细胞增殖和凋亡的影响，并探索潜在机制。方法应用小干扰ＲＮＡ技术沉默小鼠睾丸ＴＭ４细胞ｃｉｒｃＥＬＡＶＬ２的表达，沉默ｃｉｒｃＥＬＡＶＬ２后，采用ＣＣＫ⁃８法和５⁃乙炔基⁃２′脱氧尿嘧啶核苷染色评估ＴＭ４细胞增殖能力，流式细胞术和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（ＴＵＮＥＬ）检测ＴＭ４细胞的凋亡。生物信息学方法预测微小ＲＮＡ⁃３８２⁃３ｐ（ｍｉＲ⁃３８２⁃３ｐ）与ｃｉｒｃＥＬＡＶＬ２的结合位点，荧光素酶报告实验检测ｃｉｒｃＥＬＡＶＬ２与ｍｉＲ⁃３８２⁃３ｐ的结合能力。实时定量ＰＣＲ检测ｃｉｒｃＥＡＬＶＬ２和ｍｉＲ⁃３８２⁃３ｐ表达水平。结果沉默ｃｉｒｃＥＬＡＶＬ２的表达后，ＴＭ４细胞增殖速度和ＥｄＵ阳性细胞比例降低，凋亡细胞比例增加。机制研究结果显示ｃｉｒｃＥＬＡＶＬ２可结合并下调ｍｉＲ⁃３８２⁃３ｐ表达。结论ｃｉｒｃＥＬＡＶＬ２可通过结合并抑制ｍｉＲ⁃３８２⁃３ｐ表达促进小鼠ＴＭ４支持细胞增殖能力并抑制其凋亡。［关键词］支持细胞；环状ＲＮＡ（ｃｉｒｃＲＮＡ）；环状ＲＮＡ＿胚胎致死异常视觉样蛋白２（ｃｉｒｃＥＬＡＶＬ２）；微小ＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）；细胞增殖；细胞凋亡［中图分类号］Ｒ３３９．２＋１，Ｒ６９７＋．２２，Ｑ２５５［文献标志码］...
