2002023,Vol.44,No.04食品科学※生物工程常压室温等离子体诱变与微生物微液滴培养选育谷胱甘肽高产菌株凌思雨，王洲，张会敏，李闯，刘庆涛，刘艳，薛正莲*（安徽工程大学生物与食品工程学院，安徽省工业微生物分子育种工程实验室，微生物发酵安徽省工程技术研究中心，安徽芜湖241000）摘要：为提升野生毕赤酵母菌株BY-1产谷胱甘肽的能力，通过常压室温等离子体（atmosphericandroomtemperatureplasma，ARTP）诱变技术得到诱变菌株BY-1-26。进一步在摇瓶培养过程中添加1,2,4-三氮唑，提高诱变菌株产量。最后将1,2,4-三氮唑作为筛选因子，利用微生物微液滴培养（microbialmicrodropletculturesystem，MMC）仪对诱变菌株进行适应性进化，获得了1株高产谷胱甘肽的突变株BY-2-24，并对其遗传稳定性进行研究。结果表明：出发菌株BY-1经过ARTP诱变处理、抗性梯度平板初筛、MMC适应性进化、摇瓶复筛等，可以选育高产谷胱甘肽突变株。突变株BY-2-24摇瓶产量达（312.13±2.62）mg/L，较出发菌株提高134.26%，且经过7次传代培养，仍然具有较好的遗传稳定性。同时，生物量提高118.33%，表明诱变菌株的生长能力得到提高。研究表明，ARTP与MMC联合应用作为一种简便高效的微生物诱变方式，可用于定向诱变筛选高性能微生物菌株，为高通量选育目标菌株提供了参考。关键词：谷胱甘肽；毕赤酵母；常压室温等离子体诱变；适应性进化；菌种筛选BreedingofaHigh-YieldGlutathione-ProducingStrainbyAtmosphericandRoomTemperaturePlasmaMutagenesisandMicrobialMicrodropletCultureSystemLINGSiyu,WANGZhou,ZHANGHuimin,LIChuang,LIUQingtao,LIUYan,XUEZhenglian*(AnhuiEngineeringLaboratoryforIndustrialMicrobiologyMolecularBreeding,AnhuiEngineeringTechnologyResearchCenterofMicrobialFermentation,CollegeofBiologyandFoodEngineering,AnhuiPolytechnicUniversity,Wuhu241000,China)Abstract:Inordertoimprovetheabilityofawild-typestrain(BY-1)ofPichiapastoristoproduceglutathione(GSH),amutantstraindesignatedBY-1-26wasobtainedbyatmosphericandroomtemperatureplasma(ARTP)mutagenesis.Tofurtherimprovetheproductionofglutathionebythemutantduringshakeflaskculture,1,2,4-triazolewasaddedtotheculturemedium.Finally,adaptiveevolutionofthemutantstrainwascarriedoutonamicrobialmicrodropletculturesystem(MMC)using1,2,4-triazoleasascreeningfa...
