doi:10.7541/2023.2023.0066基于无壳孵化黄喉拟水龟胚胎发育活体观察徐昊旸1,2洪孝友1魏成清1刘毅辉1李伟1朱新平1*刘晓莉1*(1.中国水产科学研究院珠江水产研究所,农业农村部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室,广州510380;2.上海海洋大学水产与生命学院,上海201306)摘要:文章以黄喉拟水龟(Mauremysmutica)受精卵为材料,通过无壳孵化技术,对黄喉拟水龟胚胎发育进行活体观察,并记录胚胎发育全过程。在孵化温度为(32±0.5)℃时,孵化期平均为54d。在没有卵壳、没有外界水分和氧气的情况下,黄喉拟水龟胚胎能够完成发育全过程并成功孵出稚龟。根据胚胎发育的形态特征、时间将整个发育过程划分为1—19期。1—7期以卵黄囊血管丛、心脏形态与跳动作为分期依据;而8—19期主要以头部、四肢、背甲、颜色和尿囊等作为分期依据。无壳孵化技术在龟类胚胎发育观察中的成功应用,显示其有广泛的潜在应用前景。关键词:无壳孵化;胚胎发育;活体观察;黄喉拟水龟中图分类号:S917.4文献标识码:A文章编号:1000-3207(2023)11-1869-08近年来在鸟类中兴起的无壳人工孵化技术在医疗和精细化工等领域中发挥了重要作用。无壳孵化是一项备受关注的人工孵化技术,是人工孵化领域的一次重大突破。无壳孵化对于推动孵化科技及生命科学的进一步发展具有里程碑式的意义[1]。鸡胚因发育过程清楚,长久以来作为基础和应用科学研究领域重要的实验模型,尤其在鸡胚发育早期绒毛尿囊膜阶段,因其血管丰富,是天然的免疫缺陷宿主,也是病理学、药理学和肿瘤学等研究领域的理想实验模型[2,3]。然而,关于龟鳖等爬行动物的无壳孵化研究却鲜有报道。野外条件下龟鳖繁殖时,会在沙土上挖窝产卵,产卵后用后肢扒土将卵埋上离开,无护卵行为,卵自然孵化。在人工养殖时,为了提高孵化率,通常在龟鳖自然产卵后收集受精卵,置于孵化箱,埋于孵化介质如沙土和蛭石中,并维持适宜的孵化温度和湿度进行孵化。胚胎发育是受精完成后,受精卵细胞根据染色体上遗传信息,以一种严格的程序有条不紊地生长发育直至形成个体的过程。胚胎发育是新生命的起点,也是发育生物学的核心问题之一。龟类胚胎发育的研究起始于Rathke和Agassiz等[4]学者。随后的研究者对多种龟类如拟鳄龟(Chelydraserpenti-na)、西部锦龟(Chrysemyspictabellii)和红耳龟(Trachemysscripta)胚胎发育过程的描述大多都是将发育中的胚胎从受精卵中取出后固定观察[5—7]。黄喉拟水龟(Mauremysmutica)是我国大宗淡水养殖龟类,研究材料比较容易获得。在前期研究中...
