1080·4℃丙酮液固定剂对肾穿刺活检组织免疫荧光染色的效果观察ModernPracticalMedicine,August2023,Vol.35,No.8王伟力【关键词】丙酮液固定剂；肾脏穿刺活检组织；免疫荧光染色；IgA肾病doi:10.3969/j.issn.1671-0800.2023.08.030【中图分类号】R446.6【文献标志码】A「肾脏疾病的治疗方案与临床精准诊断和分型有关，而临床表现和实验室检查常无法做出明确诊断，需要依靠病理检查作为“金标准”进行最终判定"。肾穿刺直接免疫荧光染色是肾脏疾病病理检查的基本手段之一[2]。固定剂的选择对免疫荧光染色效果会造成较大的影响，若固定剂选择不适宜，则会导致组织破坏及边缘结构不清晰，对免疫荧光染色产生很大影响，如假阳性率高及定位不准确，严重影响送检标本的临床病理诊断4。因此，充分固定和固定剂的选择至关重要。为了更好地了解固定剂的选择对直接免疫荧光染色效果的影响，本文比较和分析了三种不同固定剂对诊断为IgA肾病的肾脏穿刺组织的直接免疫荧光染色质量，现报道如下。1资料与方法1.1一般资料收集2022年1一12月湖州市第一人民医院肾内科送检以及外院送检的112例肾脏穿刺活检组织标本，分别采用4%中性甲醛液固定剂（实验组1）、丙酮液固定剂（实验组2）及4℃丙酮液固定剂（实验组3）固定，三种不同固定剂对同一肾穿刺组织进行固定处理并比较染色效果。其中将58例后期诊断为IgA肾病的荧光染色效果纳入统计。本研究经湖州市第一人民医院医学科研与临床试验伦理委员会审批通过。1.2方法将新鲜肾穿刺标本置于玻片上，在显微镜下准确观察,确定标本是否含有肾小球,将有肾小球的标本用0.9%氯化钠注射液浸湿的纱布盛装。免疫荧光直接法染色：将新鲜的肾穿刺组织置于冻头，放入冷冻机，待标本冷冻后，将标本以4μm的厚度作者单位：313099浙江省湖州，湖州市第一人民医院（湖州师范学院附属第一医院）通信作者：王伟力，Email：59770365@qq.com【文章编号】1671-0800(2023)08-1080-03切取35～40张，用免疫载玻片贴附后进行免疫荧光直接法染色。首先将冷冻切片各9张放入实验组1、实验组2和实验组3中，在暗室固定20min，分别放入PBS浸润洗涤3次，每次3min，在切片背面用黑色记号笔围绕组织划圈，便于镜检时快速找到组织位置；擦除组织周围的PBS缓冲液，分别滴加免抗人荧光素抗体IgA、C3（稀释比均为1：25)；将切片置于湿盒内，置于25℃温箱中避光孵育60min；用PBS浸润洗涤3次，每次5min，甩干除去多余PBS缓冲液，用缓冲甘油封片，最后在荧光显微镜下...
