282DOl:10.12300/j.issn.1674-5817.2022.166Mical12a基因表达下调抑制斑马鱼血管发育杨晋娴1"2，王淑娟，翟金云，朱顺星12(1.南通大学杏林学院，南通226001；2.南通大学实验动物中心，南通226001)[摘要】目的探究斑马鱼胚胎早期发育过程中Micall2a基因的表达模式，以及该基因对斑马鱼血管发育的影响。方法使用Tg（fli:GFP）转基因斑马鱼（用绿色荧光蛋白标记血管）和野生型斑马鱼（AB），采用全胚胎原位杂交技术检测其早期胚胎不同发育阶段的Mical2a基因表达水平。通过显微注射吗啉反义寡核苷酸下调Micall2a基因，并采用实时荧光定量PCR技术检测该基因在斑马鱼胚胎不同发育阶段mRNA表达水平。采用激光共聚焦显微成像技术，观察并分析Mical/2a基因下调后斑马鱼的血管表型变化。结果受精后24h（24hourspost-fertilization，24hpf)、36hpf和48hpf的斑马鱼早期胚胎的脑、心脏、血管系统中均有Mical2a基因表达。显微注射吗啉反义寡核苷酸后Micall2a基因的mRNA水平增加，抑制斑马鱼胚胎的血管发育，导致斑马鱼节间血管发育缺陷。结论Micall2a基因表达下调可以抑制斑马鱼血管的发育。【关键词】Micall2a基因；原位杂交；胚胎发育；血管发育；斑马鱼；血管依赖性疾病[中图分类号】R-332；Q95-33[文献标志码】A【文章编号]1674-5817(2023)03-0282-06DownregulationofMicall2aGeneExpressionInhibitedVascularDevelopmentinZebrafishYANGJinxian"2,WANGShujuan',ZHAIJinyun',ZHUShunxingl?(1.XinglinCollegeofNantongUniversity,Nantong226001,China;2.LaboratoryAnimalCenterofNantongUniversity,Nantong226001,China)Correspondenceto:ZHUShunxing(ORCID:0000-0001-8011-4099),E-mail:zsx@ntu.edu.cn[ABSTRACT]ObjectiveToexploretheexpressionpatternofMicall2ageneduringtheearlydevelopmentofzebrafishembryosandtheeffectofthisgeneonzebrafishvasculardevelopment.MethodsWholeembryoinsituhybridizationwasusedtodetectMicall2aexpressionlevelsatdifferentstagesofearlyembryodevelopmentofTg(fli:GFP)transgenic(labeledwithgreenfluorescentprotein)andwildtypezebrafish(AB).Micall2ageneexpressionwasdownregulatedbymicroinjectionofamorpholineantisenseoligonucleotide,andreal-timefluorescentquantitativePCRwasusedtodetectmRNAexpressionofthegeneatdifferentdevelopmentalstagesofzebrafishembryos.Laserconfocalmicroscopywasusedtoobs...
