Correspouxlman·生物工程·359.BME&ClinMed,May2023,Vol.27,No.3生物医学工程与临床2023年5月第27卷第3期网络出版时间：2023-04-2116：13:30D0I：10.13339/j.cnkisglc.20230420.019网络出版地址：https:/kns.cnki.net/kcms/detail/12.1329.R.20230420.1410.038.htmlmiR-181b通过靶向PTEN调控缺血性脑卒中后血管新生的作用和机制研究张火烨,庄雪明，王静，徐海婷，王忠祥，王诗波，张莉，唐广满摘要：目的探讨miR-181b对缺血性脑卒中后血管生成的影响及机制。方法选择SPF级雄性SD大鼠65只，鼠龄10~12周，体质量50~280g。随机分为4组，即假手术组、模型组、miR-NC组和miR-181b组。除假手术组外，其他3组采用大脑中动脉线栓法建模，miR-NC组和miR-181b组大鼠分别尾静脉注射miR-NC及miR-181b质粒。治疗2周后，评价大鼠改良神经功能缺损评分（mNSS）。进行脑组织2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC)染色，免疫荧光检测脑组织簇分化抗原34(CD34）、血管内皮生长因子（VEGF)表达。对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC)进行转染，分为Control组（正常培养）、miR-NC组（转染miR-NC空质粒）及miR-181b组（转染miR-181bmimics质粒）。CCK-8检测细胞增殖能力。划痕实验检测细胞迁移能力。成管实验检测成管能力。荧光素酶报告实验检测miR-181b与磷酸酯酶-张力蛋白同源物基因（PTEN)的靶向关系。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞、组织miR-181b表达水平。Westernblot检测细胞、组织中PTEN蛋白表达水平。结果与假手术组比较，模型组大鼠mNSS、脑梗死面积升高（t=17.420,34.000,P<0.05）。与miR-NC组比较，miR-181b组大鼠mNSS、脑梗死面积降低（t=14.730,21.160,P<0.05）。与假手术组比较，模型组大鼠脑组织中miR-181b表达（0.14±0.02），CD34阳性细胞率（45.03%±5.22%），VEGF阳性细胞率（25.06%±5.11%），CD34、VEGF蛋白表达水平（0.25±0.06、0.21±0.04）下降,PTEN蛋白表达水平（0.93±0.05）升高（P<0.05）。与miR-NC组比较，miR-181b组大鼠脑组织中miR-181b表达（3.02±0.45），CD34阳性细胞率（68.73%±7.04%），VECF阳性细胞率（0.23%±0.06%），CD34、VECF蛋白表达水平（0.86±0.12、0.72±0.09）升高PTEN蛋白表达水平（0.37±0.02）下降（P<0.05）。miR-181b组细胞miR-181b表达水平，细胞24h、48h及72hOD值、迁移率，节段长度、分支长度、连接数和网孔数高于miR-NC组（P<0.05）。miR-181b可负性调控PTEN表达。结论过表达miR-181b可靶向PTEN改善脑缺血再灌注损...
