第33卷第4期2023年7月江苏大学学报(医学版)JournalofJiangsuUniversity(MedicineEdition)Vol.33No.4July2023circ_0000515/miR ̄1296 ̄5p/CDK2轴在乳腺癌中的作用杨琴1#ꎬ王超2#ꎬ蔺博涵2ꎬ虞绮雯2ꎬ李涛2ꎬ孙晓春2(1.江苏大学附属四院妇女保健科ꎬ江苏镇江212002ꎻ2.江苏大学医学院ꎬ江苏镇江212013)[摘要]目的:探究circ_0000515在乳腺癌进展中的可能作用机制ꎮ方法:通过GEO数据库下载乳腺癌circRNA芯片数据集(GSE101123)并采用R语言进行表达差异分析ꎬ筛选出目标circRNA分子作为研究对象并检测其在乳腺癌细胞株和组织中的表达ꎻ生物信息学分析与选择该circRNA的目的miRNAꎬ及后者对应的靶向mRNAꎬ并采用双荧光素酶实验和蛋白质印迹进行验证ꎻ将目标circRNA的siRNA转染人乳腺癌MCF ̄7和MDA ̄MB ̄231细胞ꎬCCK ̄8实验和划痕实验观察细胞的增殖和迁移ꎬ荧光定量PCR(qRT ̄PCR)检测RNA表达ꎬ蛋白质印迹实验检测mRNA编码蛋白的表达ꎮ结果:选择和下载GSE101123数据集后用R语言筛选出5个高表达的circRNA分子ꎬ选定其中的circ_0000515作为研究对象ꎬ生物信息学分析得出circ_0000515、miR ̄1296 ̄5p和细胞周期蛋白依赖性激酶2(cyclin ̄dependentkinase2ꎬCDK2)三者之间可能存在靶向关系ꎮqRT ̄PCR结果显示ꎬcirc_0000515中乳腺癌细胞株MCF ̄7和MDA ̄MB ̄231中的表达明显高于人乳腺上皮细胞株MCF ̄10Aꎻ在乳腺癌组织中的表达明显高于癌旁组织中的表达ꎮ抑制circ_0000515表达后ꎬ乳腺癌细胞增殖和迁移能力较对照组显著下降ꎬmiR ̄1296 ̄5p表达明显增高ꎻ双荧光素酶实验证实circ_0000515与miR ̄1296 ̄5p之间存在靶向关系ꎮ蛋白质印迹实验证实抑制circ_0000515表达后CDK2蛋白表达明显减低ꎮ结论:circ_0000515在乳腺癌中高表达ꎬ可能通过circ_0000515/miR ̄1296 ̄5p/CDK2作用轴影响乳腺癌进展ꎮ[关键词]circ_0000515ꎻ乳腺癌ꎻ细胞周期蛋白依赖性激酶2ꎻmiR ̄1296 ̄5pꎻ机制[中图分类号]...