PCR与G-四链体联用可视化鉴别人参与西洋参研究报告D0I:10.13995/j.cnki.11-1802/ts.035709引用格式:刘墨祎,汪香君,汪洺卉,等.PCR与G-四链体联用可视化鉴别人参与西洋参[J].食品与发酵工业,2023,49(17):69-74.LIUMoyi,WANGXiangjun,WANGMinghui,etal.VisualdiscriminationofPanaxginsengandPanaxquinquefoliumbyPCRandG-quadruplex[J].FoodandFermentationIndustries,2023,49(17):69-74.刘墨祎,汪香君,汪洺卉,李迎,刘丽梅*(北华大学医学技术学院,吉林吉林,132013)摘要人参和西洋参作为我国常用名贵中药,其价值很高,由于它们为人参属近缘物种,因此二者在形态和化学成分方面较为相似。然而人参和西洋参的药性和药效有较大区别,二者在临床上不可混用,所以对二者进行鉴定就尤为重要。该研究基于人参与西洋参基因组DNA上的特异性snp位点,设计了5'端含有G-四链体互补序列的上下游引物,通过PCR扩增出大量含G-四链体的双链DNA,与氯高铁血红素(Hemin)结合形成具有过氧化物酶活性的DNA酶(DNAzyme),并在H,O,存在的情况下催化ABTS发生颜色变化。通过对PCR体系以及显色体系的优化,达到快速、简便地鉴别人参与西洋参,灵敏度可达到0.1ng/uL。研究建立了针对人参和西洋参的PCR与G-四链体联用的可视化鉴别方法,为人参与西洋参的鉴别提供了新的途径。关键词PCR;G-四链体;人参;西洋参;可视化鉴别人参和西洋参均为五加科人参属的草本植物,其根、茎等部位均可入药,药用价值极高1-2]。由于人参和西洋参为人参属近缘物种,两者形态和化学成分较为相似,因此市场上将两者掺杂混用现象时有发生[3]。但人参与西洋参在药性和药效上存在较大差异:人参性温,补气助阳,适合体质为寒性的人服用;而西洋参性�,易于补气养阴,适合阴虚体质或者燥热的人服用[4-6],两者在临床上不可混用。目前国内外对人参和西洋参的检测方法包括形态学、化学分析法和分子生物法[7-8],但都易受到外部环境条件、加工过程和人为主观因素的影响。因此,急需建立一种简单高效的人参和西洋参鉴别方法。G-四链体(G-quadruplex)是由富含鸟嘌呤(G)的DNA或RNA序列形成的一类独特的核酸结构[9-10]G-四链体有3种不同的拓扑结构,分别为平行式、反平式和混合式"。CHENG等[12]研究发现,不同的结构下G-四链体的稳定性不同,且与氯高铁血红素结合能力也不同[13]。稳定的G-四链体结构可在K*作用下与氯高铁血红素(Hemin)结合,形成具有类似辣根过氧化物酶活性的模拟酶(DN...