基金项目:江苏省苏州市科技发展计划项目(SZS2020310)作者单位:215000苏州大学附属儿童医院感染性疾病科(王坤、田健美、孔小行、成芳芳、李嫣);210029南京医科大学第一附属医院感染病科(朱传龙)通信作者:李嫣,电子信箱:liyan0079@163.commiR-204-5p靶向调控BCL2L2促进急性肝衰竭大鼠肝细胞凋亡的研究王坤朱传龙田健美孔小行成芳芳李嫣摘要目的探讨miR-204-5p在急性肝衰竭大鼠肝组织中的表达情况及其促进肝细胞凋亡的的作用及潜在机制。方法根据随机数字表法将32只SD大鼠分为4组,即对照组(0h)、模型组(24、48、72h),每组8只。模型组腹腔注射D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导急性肝衰竭,对照组为腹腔内注射等量的0.9%氯化钠溶液。分别取对照组及模型组造模完成后24、48、72h大鼠静脉血及肝组织,ELISA检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanineaminotransferase,ALT)、天冬氨酸基转移酶(aspartateamin-otransferase,AST)、总胆红素(totalbilirubin,TBIL)的水平,通过HE、TUNEL染色法行肝组织病理学检查和肝细胞凋亡观察。生物信息学工具预测miR-204-5p的靶基因,采用双荧光素酶报告基因实验验证两者的靶向关系。RT-PCR和Westernblot法检测肝组织中miR-204-5p、BCL2L2的表达情况。结果与对照组比较,模型组随着造模时间的延长,ALT、AST、TBIL值逐渐升高,肝组织坏死程度、炎性细胞浸润逐渐加重,肝细胞凋亡指数逐渐升高。RT-PCR结果显示,随着造模时间的延长,miR-204-5p基因的相对表达水平逐渐升高,而BCL2L2基因的相对表达水平逐渐降低;Westernblot法检测结果亦显示,BCL2L2蛋白表达水平逐渐降低(P均<0.05)。miR-204-5p和BCL2L2之间存在靶向关系,miR-204-5p能够靶向调控BCL2L2表达。结论miR-204-5p可能通过靶向调控BCL2L2促进肝细胞凋亡,进而促进急性肝衰竭疾病的发生、发展。关键词急性肝衰竭微小RNA-204-5pBCL2L2凋亡中图分类号R575.3文献标识码ADOI10.11969/j.issn.1673-548X.2023.07.027StudyonmiR-204-5pPromotesHepatocyteApoptosisinAcuteLiverFailureRatsbyTargetingBCL2L2.WANGKun,ZHUChuan-long,TIANJianmei,etal.Children′sHospitalofSoochowUniversity,Jiangsu215000,ChinaAbstractObjectiveToexploretheexpressionofmiR-204-5pinlivertissueofratswithacuteliverfailure,aswellasitsroleinpromotinghepatocyteapoptosisandpotentialmechanisms.MethodsThirty-twoSDratswererandomlydividedintofourgroups[controlgroup(0h),modelgroups(24h,48hand72h)],eachgr...
