中国病理生理杂志ChineseJournalofPathophysiology2023,39(2):220-232杂志网址:http://www.cjpp.net针刺调控CIRI大鼠缺血侧海马组织差异表达circRNAs的功能研究*江姗姗1,唐红1,汪红娟1,吕倩忆2,谢灿明1,王瑶1,陈楚淘1,田浩梅1△(1湖南中医药大学针灸推拿与康复学院,湖南长沙410208;2成都市第二人民医院,四川成都610021)[摘要]目的:探讨针刺对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠脑组织的保护作用,观察针刺对CIRI大鼠缺血侧海马组织环状RNAs(circRNAs)差异表达的影响,并对其进行基因本体(GO)分析。方法:6~8周龄SD大鼠54只,运用随机数字法随机分为造模组和假手术组(sham组),造模成功后再随机分为模型组(model组)和针刺组(AC组),每组18只。采用改良Longa线栓法制备大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)模型,激光散斑成像仪监测造模前、MCAO手术后及再灌注后脑血流量,假手术组只剥离血管,不插入线栓;干预期间模型组和假手术组只捆绑不针刺,针刺组捆绑+针刺。采用改良加西亚(Garcia)评分法对神经功能进行评定,TTC染色法检测脑梗死面积,Westernblot法检测神经元核抗原(NeuN)的表达,尼氏染色法观察缺血侧海马组织神经元损伤程度,基因芯片微阵列分析筛选出缺血侧海马组织差异表达的circRNAs,并对模型组/假手术组、针刺组/模型组共同差异表达circRNAs的来源基因进行GO分析。结果:与假手术组比较,模型组大鼠脑梗死面积比显著升高(P<0.01),Garcia神经功能评分、NeuN表达量和海马CA1区尼氏染色阳性细胞数显著降低(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,针刺组脑梗死面积比显著降低(P<0.01),神经功能评分、NeuN表达量和尼氏染色阳性细胞数显著升高(P<0.05或P<0.01)。芯片筛选结果显示,与假手术组比较,模型组上调的circRNAs个数为288,下调个数为315;与模型组比较,针刺组上调的差异表达circRNAs个数为33,下调个数为18(FC>1.25,P<0.05);其中模型组/假手术组、针刺组/模型组共同差异表达的circRNAs个数为23个;GO分析显示共同差异表达circRNAs的来源基因功能涉及神经系统发育,神经元的产生、发育、分化及投射,头部、大脑及海马的发育,突触的形成、发育、延伸及运输等。结论:CIRI大鼠缺血侧海马组织circRNAs在造模后及针刺干预后均存在差异表达。针刺能显著改善CIRI大鼠的神经功能和脑梗死面积,减轻海马组织神经元损伤,其机制可能与针刺调控缺血侧海马组织多种circRNAs的差异表达及激发其促进神经元发...