胡婷婷等/山羊转录因子c-fos克隆、鉴定及功能分析ChineseJournalofBiotechnologyhttp://journals.im.ac.cn/cjbcnApr.25,2023,39(4):1684-1695DOI:10.13345/j.cjb.220708©2023ChinJBiotech,Allrightsreserved资助项目:国家自然科学基金(32072723,31902154);四川省应用基础研究计划重点项目(2022JDTD0030);西南民族大学中央高校基本科研业务费专项资金(3300222092)ThisworkwassupportedbytheNationalNaturalScienceFoundationofChina(32072723,31902154),theKeyProjectofSichuanAppliedBasicResearchProgram,China(2022JDTD0030),andtheFundamentalResearchFundsfortheCentralUniversities,SouthwestMinzuUniversity,China(3300222092).*Correspondingauthor.E-mail:linyq1999@163.comReceived:2022-09-04;Accepted:2023-01-131684生物工程学报山羊转录因子c-fos克隆、鉴定及功能分析胡婷婷1,2,王永1,2,陈定双1,2,龚成思1,2,李艳艳1,2,熊燕1,2,王建梅1,2,李志雄1,2,林亚秋1,2*1西南民族大学畜牧兽医学院,四川成都6100412西南民族大学青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部/四川省重点实验室,四川成都610041胡婷婷,王永,陈定双,龚成思,李艳艳,熊燕,王建梅,李志雄,林亚秋.山羊转录因子c-fos克隆、鉴定及功能分析[J].生物工程学报,2023,39(4):1684-1695.HUTingting,WANGYong,CHENDingshuang,GONGChengsi,LIYanyan,XIONGYan,WANGJianmei,LIZhixiong,LINYaqiu.Cloning,identificationandfunctionalanalysisofthegoattranscriptionfactorc-fos[J].ChineseJournalofBiotechnology,2023,39(4):1684-1695.摘要:转录因子c-fos在细胞增殖、分化和肿瘤形成中发挥着重要作用。本研究旨在获得山羊c-fos基因序列并阐明其生物学性质,进一步利用过表达手段揭示c-fos在山羊皮下脂肪细胞分化过程中的调控作用。本试验以简州大耳羊为研究对象,用逆转录PCR(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)技术克隆获得c-fos基因序列并分析其生物学性质;用实时荧光定量PCR(quantitativePCR,qPCR)技术检测c-fos基因在山羊心、肝、脾、肺、肾、皮下脂肪和背最长肌7个组织以及皮下脂肪细胞诱导分化的0‒120h的表达情况;用基因重组方法构建山羊pEGFP-c-fos过表达载体并转染至皮下前体脂肪细胞诱导分化后,用油红O和Bodipy染色从形态学上观察其对脂滴积聚的影响,用qPCR技术在mRNA水平上检测过表达c-fos对成脂分化标志基因的影响。结果表明,克隆的山...