·实验研究·利多卡因对糖尿病大鼠脊髓神经元的损伤作用樊晨璐陈陵张学康陈世彪郑小兰DOI:10.12089/jca.2023.03.013基金项目:江西省自然科学基金资助项目(20192BAB205041);江西省教育厅科学技术研究项目(180135)作者单位:330006南昌大学第一附属医院麻醉科(樊晨璐、张学康、陈世彪、郑小兰),应急处(陈陵)通信作者:郑小兰,Email:615833628@qq.com【摘要】目的探讨利多卡因对糖尿病大鼠脊髓神经元的损伤作用。方法选择健康SPF级雄性SD大鼠30只、GK大鼠30只,12周龄,体重180~200g。取大鼠脊髓神经元进行体外分离培养。采用随机数字表法将大鼠脊髓神经元分为四组:SD大鼠脊髓神经元组(C组)、SD大鼠脊髓神经元+利多卡因组(CL组)、GK大鼠脊髓神经元组(GK组)和GK大鼠脊髓神经元+利多卡因组(GKL组)。C组和GK组置于DMEM高糖培养基中,在37℃,5%CO2培养箱内培养24h,CL组和GKL组在相同条件下加入浓度为2mmol/L的利多卡因培养24h。采用Westernblot法检测脊髓神经元中自噬相关蛋白PINK1、mTORC1、AMPK、p-AMPK、LC3Ⅱ和LC3Ⅰ含量,DCFH-DA法检测脊髓神经元中活性氧(ROS)含量,免疫荧光法检测脊髓神经元中PINK1和LC3含量。结果与C组比较,CL组、GK组和GKL组脊髓神经元PINK1、LC3含量和p-AMPK/AMPK、LC3Ⅱ/Ⅰ比值均明显升高(P<0.05),mTORC1含量明显降低(P<0.05),ROS含量明显升高(P<0.05)。与GK组比较,GKL组脊髓神经元PINK1、LC3含量和p-AMPK/AMPK、LC3Ⅱ/Ⅰ比值明显升高(P<0.05),mTORC1含量明显降低(P<0.05),ROS含量明显升高(P<0.05)。结论利多卡因诱导GK大鼠脊髓神经元的自噬相关蛋白的表达及ROS的释放,加重对GK大鼠脊髓神经元的损伤。【关键词】利多卡因;糖尿病;脊髓神经元;损伤InjuryeffectoflidocaineonspinalcordneuronsofdiabeticratsFANChenlu,CHENLing,ZHANGXuekang,CHENShibiao,ZHENGXiaolan.DepartmentofAnesthesiology,FirstAffiliatedHospitalofNanchangUniversity,Nanchang330006,ChinaCorrespondingauthor:ZHENGXiaolan,Email:615833628@qq.com【Abstract】ObjectiveToexploretheinjuryeffectoflidocaineinspinalcordneuronsofdiabeticrats.MethodsThirtySPFhealthySDratsandthirtyGKrats,aged12weeks,weighing180-200gwereselected.Thespinalcordneuronsofratswereisolatedandculturedinvitro,andrandomlydividedintofourgroups:spinalcordneuronsofSDratsgroup(groupC),spinalcordneuronsofSDrats+...