ICS65.120B25备案号：56305-2017DB22吉林省地方标准DB22/T2692—2017饲料中金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌检测双重微滴数字PCR法DeterminationofStaphylococcusaureusandBacilluscereusinfeeds-DuplexdropletdigitalPCRmethod2017-09-30发布2017-11-30实施吉林省质量技术监督局发布本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2692—2017I前言本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2015给出的规则起草。本标准由中华人民共和国吉林出入境检验检疫局提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心。本标准主要起草人：聂丹丹、王宁宁、王准、曲辉、彭勃、孙晶莹、王玮琳、刘金华、罗雁非。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2692—20171饲料中金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌检测双重微滴数字PCR法警示——使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验。本标准并未指出所有可能的安全问题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件。1范围本标准规定了饲料中金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌检测双重微滴数字PCR法的试剂和材料、仪器和设备、样品、试验步骤、试验数据处理及防止污染措施。本标准适用于饲料中金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌检测的双重微滴数字PCR法。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB4789.10-2016食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样GB19489实验室生物安全通用要求GB/T26427-2010饲料中蜡样芽孢杆菌的检测WS/T230-2002临床诊断中聚合酶链式反应（PCR）技术应用3原理微滴式数字PCR平台通过产生微小油包水体系实现反应体系的分割，根据金黄色葡萄球菌的nuc特异性基因序列和蜡样芽孢杆菌的16s保守基因序列对饲料中金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌进行鉴定。经PCR扩增后，根据泊松分布原理及阳性微滴的个数与比例即可得出靶分子的起始拷贝数或浓度，实现对金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌的快速定性检验。4试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯。实验用水符合GB/T6682中二级水的要...
