ICS65.120B20DB37山东省地方标准DB37/T574—2005饲料中地西泮快速筛选通则酶联免疫吸附测定法GeneralRuleofDiazepanScreeninginFeedsEnzymeLinkedImmunosorbentAssay2006-01-23发布2006-03-01实施山东省质量技术监督局发布山东省地方标准公开山东省地方标准公开DB37/T574—2005I前言本标准由山东省畜牧办公室、山东省畜牧业标准化技术委员会提出。本标准起草单位：山东省饲料监察所。本标准主要起草人：徐强、李会荣、孟凡胜、李俊玲、刘华阳。山东省地方标准公开山东省地方标准公开DB37/T574—20051饲料中地西泮快速筛选通则--酶联免疫吸附测定法1范围本标准规定了用酶联免疫吸附法测定饲料中地西泮的方法。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料中地西泮的快速筛选。本方法的最低定量限为1mg/kg。该方法适合于对试样的筛选，检测结果阳性者，需进一步用其他方法确证。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB／T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理利用物理方法将地西泮抗体吸附于固相载体表面，根据抗原抗体的特异性反应，加入标准或试料提取液及酶标地西泮抗原（已知抗原）与抗体进行特异性的免疫竞争反应。未反应的酶标物在洗涤中被清除，结合的酶标记物可以由显色物显示出来。显色的强弱与样品中的地西泮的量成反比。4试剂和材料除非另有说明，本标准所用试剂均由试剂盒厂商提供，水为蒸馏水，符合GB/T6682三级水的规定。不同品牌试剂盒试剂组成略有差别。4.1酶标记的地西泮。4.2地西泮阳性、阴性对照品。4.3底物溶液。4.4甲醇溶液：80%。4.5终止液。4.6滤纸。4.7吸水纸。5仪器、设备5.1酶标板：48孔或96孔；5.2粉碎机。5.3天平：感量0.01g。5.4漩涡混合器。5.5离心机：转速３000r/min以上。5.6离心管：50mL、1.5mL。山东省地方标准公开山东省地方标准公开DB37/T574—200525.7单道、多道微量加液器。5.8吸头。5.9酶标仪。6试样的制备取饲料样品1000g，用四分法缩减分取200g左右，粉碎全部过0.45mm孔径筛，充分混匀，装入磨口瓶中备用。7分析步骤不同品牌的试剂盒其测定步骤略有差别，使用不同品牌试剂盒时，试样的提取方法和测试程序可根据试剂盒说明书略作调整。7.1试样的提...
