ICS11.220CCSB4115内蒙古自治区地方标准DB15/T2906—2023牛副流感病毒3型检测技术规范Technicalspecificationfordiagnosticofbovineparainfluenzavirustype32023-03-10发布2023-04-10实施内蒙古自治区市场监督管理局发布DB15/T2906—2023I前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC19）归口。本文件起草单位：内蒙古大学、内蒙古蒙微生物科技有限公司、金宇保灵生物药品有限公司、内蒙古科技大学包头师范学院、内蒙古自治区动物疫病预防控制中心、吉林农业科技学院。本文件主要起草人：王炜、王镓磊、马艳华、赵丽霞、杨昱萍、陈坚、郭宇、郭利、武有志、王岩、胡薇。DB15/T2906—20231牛副流感病毒3型检测技术规范1范围本文件规定了牛副流感3型的临床诊断、病原分离鉴定、RT-PCR、ELISA等诊断技术要求。本文件适用于奶牛饲养场（户）、肉牛饲养场（户）和动物疫病检疫、诊疗单位对牛副流感病毒3型的检测。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。牛副流感病毒3型bovineparainfluenzavirustype3,BPIV3属于副黏病毒科，呼吸道病毒属成员，为有囊膜的单股负链RNA病毒（见附录A中图A.1）。4临床诊断流行病学牛副流感一年四季均可发生，以秋冬、初春季多见。各种年龄牛均可感染。病牛和带毒牛是本病主要传染源，可经接触、呼吸道和子宫内感染，多与其它疾病混合感染。临床症状感染牛主要临床表现为高热（体温≥41℃）、呼吸困难、流浆液性或黏脓性鼻液、咳嗽、喘等呼吸道症状。病理剖解可见支气管肺炎，支气管黏膜肿胀、出血，管腔中有纤维素块，局部肺组织见灰色或红色肝样实变等。5实验室诊断病毒分离DB15/T2906—202325.1.1试剂耗材牛肾细胞系（MDBK细胞系）、棉签、马血清（HBS）、DMEM培养基、青霉素、链霉素、细胞培养板。5.1.2仪器电子天平、研磨仪、台式冷冻离心机、生物安全柜、CO2培养箱、倒置显微镜、冰箱。5.1.3病料采集5.1.3.1鼻拭子用无菌棉签刮取鼻道分泌物，然后放入3mL～5mL含1000IU/mL青霉素和1000μg/mL链霉素的DMEM培养基...
