ICS65.120B46备案号：辽宁省地方标准DB21DB21/T1687—2008生鲜肉中三聚氰胺的测定DeterminationofMelamineinFreshMeats2008-11-19发布2008-12-01实施辽宁省质量技术监督局发布DB21/T1687—2008前言本标准由辽宁省动物卫生监督管理局提出并归口。本标准由辽宁省质量技术监督局发布。本标准附录A为资料性附录。本标准负责起草单位：农业部饲料质量及畜产品安全监督检验测试中心（沈阳）。本标准起草人：王淑芬张建勋刘全刘敬先刘凯杨希国于家丰王丽娜田晓玲曲韵坤。本标准首次发布。IDB21/T1687—2008生鲜肉中三聚氰胺的测定1范围本标准规定了生鲜肉中三聚氰胺残留检测的制样和酶联免疫（ELISA）、高效液相色谱（HPLC）、气相色谱-质谱法(GC-MS)测定方法。本标准适用于生鲜猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉中三聚氰胺残留检测。本标准中的酶联免疫法为筛选方法，筛选结果为阳性的样品需要用仲裁法确证，高效液相色谱法和气相色谱-质谱法为定量方法，其中气相色谱-质谱法为仲裁法。酶联免疫法定量限为0.20mg/kg，高效液相色谱法定量限为0.20mg/kg，气相色谱-质谱法定量限为0.10mg/kg。2规范性引用文件下列文件的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规则和试验方法3制样3.1试样的制备从原始样品中分取出约500g，经绞肉机绞碎、匀质使均匀。3.2试样的保存-20℃以下贮存。4酶联免疫法4.1原理本方法基于酶联免疫法中的竞争性测定法原理，通过样品萃取物中的三聚氰胺与三聚氰胺酶标记物竞争结合微孔中的三聚氰胺抗体，除去未结合的三聚氰胺酶标记物后，结合的酶标记物将无色的底物转化为蓝色的物质，加终止液后在450nm下读取各微孔吸光度值。吸光度值与样品中的三聚氰胺含量成反比。4.2试剂和溶液4.2.1除特殊注明外，本标准所用试剂均为分析纯。水应符合GB/T6682二级水的规定。4.2.2三聚氰胺试剂盒（附系列标准品溶液，酶标记物，清洗液、底物，终止液，说明书）。4.2.3异辛烷（C8H18）4.2.4三氯甲烷（CHCl3）4.2.5异辛烷+三氯甲烷混合液：准确量取40ml异辛烷（4.2.3）和60ml三氯甲烷(4.2.4),混匀即得。4.2.610%甲醇/20mMPBS：称取0.62gNaH2PO4·H2O，5.73gNa2HPO4·12H2O和9gNaCl用蒸馏水溶解，并定容至1000mL，取此溶...
