中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜２０５８—２００８进出口蜂王浆中氯霉素残留量测定方法酶联免疫法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犮犺犾狅狉犪犿狆犺犲狀犻犮狅犾狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀狉狅狔犪犾犼犲犾犾狔犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋—犈狀狕狔犿犲犾犻狀犽犲犱犻犿犿狌狀狅狊狅狉犫犲狀狋犪狊狊犪狔２００８０４２９发布２００８１１０１实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布前言本标准的附录Ａ为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国浙江出入境检验检疫局。本标准主要起草人：张晓峰、施伟良、朱振江、方莹、董强。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。Ⅰ犛犖／犜２０５８—２００８进出口蜂王浆中氯霉素残留量测定方法酶联免疫法１范围本标准规定了蜂王浆及冻干粉中氯霉素残留量的酶联免疫测定方法。本标准适用于蜂王浆及冻干粉中氯霉素残留量的测定。２规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。ＧＢ／Ｔ６６８２分析实验室用水规格和试验方法（ＧＢ／Ｔ６６８２—１９９２，ｎｅｑＩＳＯ３６９６：１９８７）３方法提要本标准以三氯乙酸来沉淀蜂王浆中的蛋白质和提取残留的氯霉素，然后以ＨＬＢ净化。微孔板中包被有绵羊抗兔ＩｇＧ抗体，加入特异性抗体（兔抗氯霉素抗体）、酶标记氯霉素、氯霉素标准品或样品提取液后，特异性抗体与包被的绵羊抗兔ＩｇＧ抗体结合，同时游离氯霉素和酶标记氯霉素竞争性的与特异性抗体结合。通过洗涤除去未结合的氯霉素和酶标记氯霉素，然后加入底物显色，用酶标仪测定吸光度，根据吸光度值得出试样中氯霉素的含量。４试剂和材料除注明外，所有试剂均为分析纯，水为ＧＢ／Ｔ６６８２规定的一级水。４．１氯霉素检测试剂盒（参见附录Ａ）。４．２甲醇。４．３５％三氯乙酸：５．０ｇ三氯乙酸以水溶解并定容至１００ｍＬ。４．４３０％甲醇：３０．０ｍＬ甲醇（４．２）以水定容至１００ｍＬ。４．５异辛烷三氯甲烷混合液：异辛烷、三氯甲烷以２∶３（体积比）的比例混合。４．６ＨＬＢ小柱：Ｏａｓｉｓ（或相当产品），３ｍＬ（６０ｍｇ）。４．７氯...
