中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1467—2020代替SN/T1467—2004小鹅瘟检疫技术规范Quarantineprotocolforgooseparvovirus2020-12-30发布2021-07-01实施ICS11.220CCSB41中华人民共和国海关总署发布SN/T1467—2020I前言本文件按照GB/T1.1—2020给出的规则起草。本文件替代SN/T1467—2004《小鹅瘟病毒分离和琼脂免疫扩散试验方法》。本文件与SN/T1467—2004相比,除编辑性修改外,主要技术变化如下:——增加聚合酶链反应(PCR)方法。——修订了附录A,增加了附录B、附录C和附录D。本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位:中华人民共和国南京海关。本文件主要起草人:罗朝科、徐晔、唐泰山、李超美、朱雪良、刘学辉、王成龙、段宏安、周毅、王凤芝、丁超。本文件所代替文件的历次版本发布情况为:——SN/T1467—20041SN/T1467—2020小鹅瘟检疫技术规范1范围本标准规定了小鹅瘟病毒的临床诊断、病毒分离试验、琼脂免疫扩散试验和聚合酶链反应(PCR)等技术要求。本标准适用于禽类及其产品中小鹅瘟病毒的出入境检疫。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4临床诊断小鹅瘟简介参见附录A,小鹅瘟的发病症状与病理变化参见附录B。5实验室诊断5.1样品采集5.1.1对死亡或濒死动物,无菌采取肝、胰、脾、肾、脑等样品。对活动物,采集全血。对动物产品,采集内脏、组织。5.1.2样品的采集和包装应采用无菌器具,采集后应密封、冷藏并立即运送到实验室。5.1.3样品用含抗生素的pH7.0~7.4磷酸盐缓冲液(PBS)(配制方法见附录C)制成10%~20%的悬浮液,4℃3000r/min离心10min,取上清液经0.22µm滤膜过滤除菌。采集或处理的样品在2℃~8℃条件下保存不超过4d,若需长期保存,应放置-70℃冰箱,但应避免反复冻融。5.2病毒分离试验5.2.1试剂——青霉素(工作浓度10000IU/mL);——链霉素(工作浓度10000IU/mL);——9日龄~11日龄SPF鹅胚。2SN/T1467—20205.2.2主要设备——生物安全柜;——离心机;——恒温培养箱;——微量可调移液器。5.2.3试验程序5.2.3.1鹅胚接种吸取经过滤除菌的样品处理液,经尿囊腔接种至少5枚9日龄~11日龄的SPF鹅胚,0.2mL/枚,35℃~37℃孵育4d~7d。...