GBT 8312-1987 茶 咖啡碱测定.pdf

中华人民共和国国家标准中华人民共和国国家标准 茶茶 咖啡碱测定咖啡碱测定 GB/T 831287 Tea-Determination of caffeine content 本标准适用于茶叶中咖啡碱的测定。本标准适用于茶叶中咖啡碱的测定。在茶叶水浸出物中除去叶蛋白、茶多酚等物质后在茶叶水浸出物中除去叶蛋白、茶多酚等物质后,留下的生物碱其测定波长为留下的生物碱其测定波长为 274nm 者者,均称茶叶咖啡碱。均称茶叶咖啡碱。1 原理原理 茶叶中的咖啡碱易溶于水茶叶中的咖啡碱易溶于水,除去干扰物质后除去干扰物质后,用特定波长测定其含量。用特定波长测定其含量。2 仪器和用具仪器和用具 实验室常规仪器及下列各项实验室常规仪器及下列各项:2.1 紫外分光光度仪。紫外分光光度仪。2.2 分析天平分析天平:感量感量 0.0001g。3 试剂和溶液试剂和溶液 本标准所用试剂本标准所用试剂,除另有规定外除另有规定外,均为分析纯均为分析纯(AR);水为蒸馏水。水为蒸馏水。3.1 碱性乙酸铅溶液碱性乙酸铅溶液:称取称取 50g 碱性乙酸铅碱性乙酸铅(HG 3139681),加水加水 100mL,静置过夜。静置过夜。3.2 盐酸盐酸(GB 62277):0.01N 溶液溶液,取取 0.9mL 盐酸盐酸,用水稀释用水稀释 1L,摇匀。摇匀。3.3 硫酸硫酸(GB 62577):9N 溶液溶液,取硫酸取硫酸 250mL,用水稀释至用水稀释至 1L,摇匀。摇匀。3.4 咖啡碱标准液咖啡碱标准液:称取称取 100mg 咖啡碱咖啡碱(纯度不低于纯度不低于 99)溶于溶于 100mL 水中水中,作为母液作为母液,准确准确 吸取吸取 5mL 加水至加水至 100mL 作为工作液作为工作液(1mL 含咖啡碱含咖啡碱 0.05mg)。4 操作方法操作方法 4.1 取样取样 按按 GB 830287茶茶 取样的规定取样。取样的规定取样。4.2 试样的制备试样的制备 按按 GB 830387茶茶 磨碎试样的制备及其干物质含量测定的规定磨碎试样的制备及其干物质含量测定的规定,制备试样。制备试样。4.3 测定步骤测定步骤 4.3.1 试液的制备试液的制备 按按 GB 830587茶茶 水浸出物测定中水浸出物测定中 3.4.1 的规定的规定,制备试液。制备试液。4.3.2 测定测定 用移液管准确吸取试液用移液管准确吸取试液(4.3.1)20mL 移入移入 250mL 容量瓶中容量瓶中,加入加入 10mL0.01N 盐酸盐酸(3.2)和和 2mL 碱性乙酸铅溶液碱性乙酸铅溶液(3.1),用水准确稀释至刻度用水准确稀释至刻度,充分混匀充分混匀,静置澄清过滤静置澄清过滤,准确吸取滤液准确吸取滤液 50mL,注入注入 100mL 容量瓶中容量瓶中,加入加入 0.2m19N 硫酸溶液硫酸溶液(3.3),加水稀释至刻度加水稀释至刻度,混匀混匀,静置澄清静置澄清 过滤。用过滤。用 10mm 比色杯比色杯,在波长在波长 274nm 处处,以试剂空白溶液作参比以试剂空白溶液作参比,测定吸光度测定吸光度(A)。4.3.3 咖啡碱标准曲线的制作咖啡碱标准曲线的制作 分别吸取分别吸取 0、5、10、15、20、25、30mL 咖啡碱工作液咖啡碱工作液(3.4)于一组于一组 100mL 容量瓶中容量瓶中,各各 加入加入 4.0mL 盐酸溶液盐酸溶液(3.2),用水稀释至刻度用水稀释至刻度,混匀混匀,用用 10mm 石英比色杯石英比色杯,在紫外分光光度仪在紫外分光光度仪 上选择狭缝上选择狭缝 0.10.18mm,在波长在波长 274nm 处处,以试剂空白溶液作参比以试剂空白溶液作参比,测定吸光度测定吸光度(A)。将测。将测 得的吸光度与对应的咖啡碱浓度绘制标准曲线。得的吸光度与对应的咖啡碱浓度绘制标准曲线。5 结果计算结果计算 5.1 计算方法和公式计算方法和公式 茶叶中咖啡碱含量茶叶中咖啡碱含量,以干态质量百分率表示以干态质量百分率表示,按下式计算按下式计算:C 250 100 L1 1000 20 50 咖啡碱咖啡碱()100 Mm 式中式中:C根据试样测得的吸光度根据试样测得的吸光度(A),从咖啡碱标准曲线上查得的咖啡碱相应含量从咖啡碱标准曲线上查得的咖啡碱相应含量,mg/mL;L1试液总量试液总量,mL;M试样用量试样用量,g;m试样干物质含量百分率。试样干物质含量百分率。如果符合重复性如果符合重复性(5.2)的要求的要求,取两次测定的算术平均值作为结果。取两次测定的算术平均值作为结果。5.2 重复性重复性 同一样品的两次测定值之差同一样品的两次测定值之差,每每 100g 试样不得超过试样不得超过 0.2g。6 结果报告结果报告 试验报告应包括下列内容试验报告应包括下列内容:a.使用的方法使用的方法;b.测定的结果测定的结果(取小数点后一位取小数点后一位);c.本标准中末规定的或另加的操作本标准中末规定的或另加的操作;d.试样的名称和产地试样的名称和产地;e.试验日期试验日期,操作人员。操作人员。附加说明附加说明:本标准由全国食品工业标准化技术委员会提出。本标准由全国食品工业标准化技术委员会提出。本标准由中国农业科学院茶叶研究所、商业部杭州茶叶加工研究所和上海进出口商品本标准由中国农业科学院茶叶研究所、商业部杭州茶叶加工研究所和上海进出口商品 检验局负责起草。检验局负责起草。本标准主要起草人李名君、钟萝、严家辉、程坤、郭雯飞、王济安。本标准主要起草人李名君、钟萝、严家辉、程坤、郭雯飞、王济安。中华人民共和国商业部中华人民共和国商业部 1987-11-19 批准批准 1988-07-01 实施实施