中华人民共和国国家标准饲料中含硫氨基酸测定方法-一离子交换色谱法GB/'f15399一94Determinationofsulfur-ionexchangeaminoacidsinfeedstuffschromatography1主题内容与适用范围本标准规定了饲料中含硫氨基酸的测定方法。本标准适用于单一饲料、配合(混合)饲料及浓缩饲料。2引用标准GB/T6432饲料粗蛋白质测定方法GB/T6439饲料水溶氯化物测定方法3原理饲料中的含硫氨基酸(胧氨酸、半胧氨酸和蛋氨酸)用过甲酸氧化并经盐酸水解生成磺基丙氨酸和蛋氨酸矾，此二产物可用离子交换色谱法分离测定。4试剂除特别注明者外，所有试剂均为分析纯，水为去离子水，电导率小于1MS4.1过甲酸溶液4.1.1常规过甲酸溶液:将30%过氧化氢(GB6684)与88%甲酸(HG3-1296)按1:9(V/V)混合，于室温下放置1h，置冰水浴中冷却30min，临用前配制。4.1.2浓缩料用过甲酸溶液:将常规过甲酸溶液中按3mg/mL加入硝酸银(GB670)即可。此溶液适用于氯化钠含量小于3%的浓缩料。当浓缩料中氯化钠含量大于3%时，氧化剂中硝酸银浓度可用下式计算:C,)1.454XmX蛛··························.⋯⋯(1)式中:C,—过甲酸中硝酸银的浓度，mg/mL;C}—样品中氯化钠含量，mg/mL;。—样品质量,mg,4.2氧化终止剂4.2.148氢澳酸(GB621)4.2.2偏重亚硫酸钠溶液:33.6g偏重亚硫酸钠(HG3-909)加水定容至100ML4.3酸解剂国家技术监督局1994一12一30批准1995一07一01实施GB/T15399一944.3.16.0mot/L盐酸溶液:将优级纯盐酸(GB622)与水按1:1(V/V)混合。4.3.26.8mol/L盐酸溶液:将优级纯盐酸(GB622)1133mL加水稀释重2000ml。4.47.5mol/L氢氧化钠溶液:取优级纯氢氧化钠(GB629)30g，加水溶解并定容至100ml-4.5稀释上机用柠檬酸钠缓冲液，pH2.2,0.2mol/LNa:称取柠檬酸三钠(HG3-1298)19.6g，用水溶解后加入优级纯盐酸16.5mL，硫二甘醇5.0mL,苯酚(HG3-1165)1g，最后加水定容至1000ml,，用G4垂熔玻璃砂芯漏斗过滤。4.6不同pH及离子强度的洗脱用柠檬酸钠缓冲液:按仪器说明书配制。4.了荀三酮溶液:取苟三酮适量，按仪器说明书配制。4.8磺基丙氨酸一蛋氨酸矾标准贮备液,2.50pmol/mL:准确称取磺基丙氨酸105.7mg和蛋氨酸矾113.3mg，加水溶解并定容至250mL.4.9氨基酸混合标准贮备液:含有L一天门冬氨酸、L一苏氨酸等17种常规蛋白质水解分析用L-A基酸，各组份浓度为2.50pmol/ml-4.10混合氨基酸标准工作液:吸取磺基丙氨酸一蛋氨酸矾标准贮备液(4.7)和氨基酸混合标准贮备液(4.8)各1.00mL,置于50mL容量瓶中，加稀释上...
