中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T5196—2020代替SN/T1162—2002猪轮状病毒感染检疫技术规范Quarantineprotocolforinfectionwithporcinerotavirus中华人民共和国海关总署发布ICS11.220CCSB412020-12-30发布2021-07-01实施ISN/T5196—2020前言本文件按照GB/T1.1—2020的规定起草。本文件由中国人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位:中华人民共和国福州海关、中华人民共和国南京海关、中华人民共和国南宁海关、中华人民共和国深圳海关、中华人民共和国海口海关、厦门瑞德利校准检测技术有限公司。本文件主要起草人:张体银、姜焱、聂丹、郑腾、花群义、李丹丹、王武军、白泉阳、张志灯、于师宇、陈美传。1SN/T5196—2020猪轮状病毒感染检疫技术规范1范围本文件规定了猪轮状病毒感染酶联免疫吸附试验、反转录-聚合酶链反应和实时荧光反转录-聚合酶链反应检测技术。本文件适用于猪轮状病毒感染的抗体检测和病原核酸鉴定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T18088出入境动物检疫采样GB19489实验室生物安全通用要求3术语、定义和缩略语本文件没有需要界定的术语和定义。下列缩略语适用于本文件:cDNA互补脱氧核糖核酸(complementarydeoxyribonucleicacid)Ct循环阈值(cyclethreshold)ddH2O双蒸水(couble-distillationH2O)DEPC焦碳酸二乙酯(diethypyrocarbonate)dNTP三磷酸脱氧核苷酸(deoxynucleosidetriphosphate)EB溴化乙锭(ethidiumbromide)ELISA酶联免疫吸附试验(enzyme-linkedimmunosorbentassay)HRP辣根过氧化物酶(horseradishperoxidase)OD值光密度值(opticdensityvalue)PBS磷酸盐缓冲液(phosphate-bufferedsalinebuffer)PRV猪轮状病毒(porcinerotavirus)RNA核糖核酸(ribonucleicacid)RT-PCR反转录聚合酶链式反应(reversetranscriptionpolymerasechainreaction)TBE三羟甲基氨基甲烷-硼酸-乙二胺四乙酸(trihydroxymethylaminomethane-boricacid-ethylenediaminetetraaceticacid)4仪器和设备4.1Ⅱ级生物安全柜。4.2高压灭菌器。4.396孔酶标板。2SN/T5196—20204.4恒温培养箱。4.5洗板机。4.6酶标仪。4.7冷冻离心机。4.8单道可调微量移液器(2μL~20μL,20μL~200μL,100μL~1...