中华人民共和国国家标准水质物质对蚤类(大型蚤)急性毒性测定方法GB/T13266一91Waterquality-DeterminationoftheacutetoxicityofsubstancetoDaphnia(Daphniamagnastraus)本标准参照采用国际标准ISO6341-1982《水质—大璧蚤运动抑制的测定》。本标准用大型蚤〔Daphniamagnastraus(CladoceraCrustacea)〕为试验生物。测定物质或废水的半数抑制浓度，半数致死浓度(24h-EC50,24h-LC5。或48h-EC50,48h-LC50)，用于判断物质或废水的毒性程度。1适用范围本标准适用于以下范围:a.在试验条件下可溶的化学物质(包括工业原料和产品、食品添加剂、农药、医药等)。b，工业废水。c生活污水。d地表水、地下水。2原理2.124h-EC50,48h-EC50指在24或48h内百分之五十的受试蚤运动受抑制时被测物的浓度。2.2运动受抑制(Immobilization)反复转动试验容器,15s之内失去活动能力的大型蚤，被认为运动受抑制。即使其触角仍能活动，也应算做不活动的个体。2.324卜LC50,40h-LC50指在24或48h内百分之五十的受试蚤死亡时被测物的浓度，以受试蚤心脏停止跳动为其死亡标志。3试验材料3，试验生物为大型蚤〔(Daphniamagnastraus)(甲壳纲，枝角亚目)〕。保持良好的培养条件，使大型蚤的繁殖被约束在孤雌生殖的状态下(见附录A),选用实验室条件下培养3代以上的、出生6^-24h的幼蚤为试验蚤。试验蚤应是同一母体的后代。3.2试验用水:3.2.1配制人工稀释水为试验用水。新配制的标准稀释水pH为7.8士。2,硬度250士25mg/L(以CaCO。计)Ca/Mg比例接近4:1,溶解氧浓度在空气饱和值的80%以上，并不含有任何对大型蚤有毒的物质。人工稀释水用电导率10p5/cm(1mS/m)以下的蒸馏水或去离子水(以下简称水)按下述方法配蘸而而瘫1991-Q9下4I蔺-1992一Q$一Q1实施GB/T13266一91制。氯化钙溶液将11.76g氯化钙(CaCt,·2H20)溶于水中稀释至1L,b.硫酸镁溶液将4.93g硫酸镁(MgSO,·7H20)溶于水中稀释至11。碳酸氢钠溶液将2.59g碳酸氢钠(NaHC03)溶于水中稀释至1L,d.氯化钾溶液将0.25g氯化钾(KCl)溶于水中稀释至1L.各取以上四种溶液25mL混合，稀释至1L.必要时可用氢氧化钠溶液或盐酸溶液调节pH值，使其稳定在7.8士。.2。标准稀释水应容许大型蚤在其中生存至少48h，并尽可能检查稀释水中不含有任何已知的对大型蚤有毒的物质。例如:氯、重金属、农药、氨或多氯联苯。3.2.2如果所进行的试验需要使用其他稀释水或改变稀释水的pH，应在试验报告中注明所用稀释水的性质。要求稀释水的硬度在150^-300mg/L(以CaCO3计)范围内，Ca...
