·研究报告·生物技术通报BIOTECHNOLOGYBULLETIN2023,39(6):325-334收稿日期：2022-11-14基金项目：国家绒毛用羊产业技术体系（CARS-39），国家肉羊产业技术体系（CARS-38）作者简介：马钰静，女，硕士研究生，研究方向：动物繁殖学；E-mail:mayujing66@126.com通讯作者：刘月琴，女，教授，研究方向：羊繁殖调控；E-mail:Liuyueqin66@126.com敲除G0S2基因对绵羊卵巢颗粒细胞增殖、类固醇激素及相关基因表达的影响马钰静段春辉贺名扬张英杰杨若晨王泳刘月琴（河北农业大学动物科技学院，保定071000）摘要：本文旨在探究G0S2基因对绵羊卵巢颗粒细胞增殖，雌激素（E2）和孕酮（P4）分泌，以及类固醇分泌相关基因和细胞凋亡基因表达的影响。采集小尾寒羊新鲜卵巢，用割吸法收集中小卵泡的卵泡液，离心分离颗粒细胞，分为试验组和对照组，试验组采用CRISPR-Cas9基因编辑技术敲除G0S2基因，获得重组表达载体PX458-sgRNA-G0S2转染至颗粒细胞；对照组转染PX458质粒至颗粒细胞。检测颗粒细胞活力和凋亡情况，以及E2和P4水平及相关基因的表达量。结果表明，试验组G0S2mRNA的表达量及蛋白水平极显著低于对照组（P<0.01），分别降低了66%和70%，G0S2敲除成功。试验组颗粒细胞的增殖活力显著高于对照组（P<0.05），细胞凋亡率极显著下降56%（P<0.01）。试验组E2水平显著高于对照组（P<0.05），P4水平显著低于对照组（P<0.05）。试验组颗粒细胞中StAR、CYP11、3β-HSD的表达量极显著低于对照组（P<0.01），CYP19的表达量极显著高于对照组（P<0.01）。与对照组相比，试验组颗粒细胞中Caspase3和Bax的表达极显著下调（P<0.01），Bcl-2的表达极显著上调（P<0.01）。上述结果表明，敲除G0S2基因能促进在绵羊卵巢颗粒细胞的增殖，抑制其凋亡，通过下调StAR、CYP11、3β-HSD，上调CYP19的表达影响E2和P4的分泌。关键词：G0S2；绵羊；颗粒细胞；增殖；凋亡；类固醇激素DOI:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2022-1398EffectsofKnockoutofG0S2GeneinOvarianGranulosaCellProliferation,SteroidsHormonesandRelatedGeneExpressionMAYu-jingDUANChun-huiHEMing-yangZHANGYing-jieYANGRuo-chenWANGYongLIUYue-qin（CollegeofAnimalScienceandTechnology,AgriculturalUniversityofHebei,Baoding071000）Abstract:TheobjectiveofthisresearchistoexploretheeffectsoftheG0S2geneonthecellproliferationofovariangranulosacells,thesecretionofestrogen（E2）andprogesterone...
