第41卷第3期2023年6月广东医科大学学报JOURNALOFGUANGDONGMEDICALUNIVERSITYVol.41No.3Jun.2023255泛素结合酶E2变体蛋白对MEFs细胞衰老的影响徐舜1,2,骆诗凌1,2,谢健鸿1,2,刘新光1,2,3,袁源1,2*（1.广东省医学分子诊断重点实验室，广东东莞523808;2.广东医科大学衰老研究所，广东东莞523808;3.广东医科大学生物化学与分子生物学研究所，广东东莞523808）摘要：目的探讨泛素结合酶E2变体蛋白（UBE2V1）对MEFs细胞衰老的影响。方法Westernblot检测UBE2V1在年轻（2月龄）和年老小鼠（24月龄）各组织中的表达差异，以荧光定量PCR及Westernblot检测UBE2V1在年轻和衰老MEFs细胞中表达的差异，荧光定量PCR和Westernblot验证Ube2v1基因的siRNA沉默效果，β-半乳糖苷酶染色检测Ube2v1表达下调对MEFs细胞衰老的影响，Edu和AlarmarBlue检测Ube2v1基因沉默后MEFs细胞增殖能力的变化。结果UBE2V1在衰老小鼠的心脏、肝脏、肾脏和脑组织中表达下调，同时在衰老的MEFs细胞中也明显表达下调，在年轻细胞中沉默Ube2v1基因后β-半乳糖苷酶染色结果显示衰老的细胞数量明显增加，且Edu和AlarmarBlue检测发现Ube2v1基因沉默后MEFs细胞增殖能力显著下降。结论沉默Ube2v1可通过抑制MEFs细胞增殖，从而促进细胞衰老。关键词：UBE2V1；MEFs；衰老中图分类号：Q291文献标志码：A文章编号：2096-3610（2023）03-0255-04Effectofubiquitin-bindingenzymeE2variantoncellularsenescenceofMEFsXUShun1,2,LUOShi-ling1,2,XIEJian-hong1,2,LIUXin-guang1,2,3,YUANYuan1,2*(1.GuangdongProvincialKeyLaboratoryofMedicalMolecularDiagnostics,GuangdongMedicalUniversity,Dongguan523808,China;2.InstituteofAgingResearch,GuangdongMedicalUniversity,Dongguan523808,China;3.InstituteofBiochemistry&MolecularBiology,GuangdongMedicalUniversity,Dongguan523808,China)Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectofubiquitin-bindingenzymeE2variant(UBE2V1)oncellularsenescenceofMEFs.MethodsWesternblotwasusedtodetectthedifferenceofUBE2V1expressioninthetissuesofyoung(2monthsofage)andold(24monthsofage)mice.QuantitativePCRandWesternblotwereusedtodetectthedifferenceofUBE2V1expressioninyoungandsenileMEFscells.QuantitativePCRandWesternblotwereusedtoverifythesiRNAsilencingeffectofUbe2v1gene.β-galactosidasestainingwasusedtodetecttheinfluenceofdownregu...
