细胞增殖活性原位检测(jiǎncè)技术及应用重庆(zhònqìn)ɡɡ医科大学病理教研室叶秀峰第一页,共七十四页。细胞周期(CellCycle)•一、细胞周期概述•概念(gàiniàn):细胞周期是指连续分裂的细胞从上一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂完成所经历的整个过程。•主要事件:遗传信息载体DNA复制,通过有丝分裂将两份拷贝DNA平均分配到两个子代细胞中第二页,共七十四页。•分期(fēnqī):分为4个时期.即G1SG2M期第三页,共七十四页。(一)Gl期(Gapphase)是指从有丝分裂完成到DNA复制之前这一阶段,包括.RNAs及蛋白的合成,所以又称复制前期或合成前期。这一时期细胞主要活动是为DNA的复制和蛋白质合成作准备,主要特点为:•(1)各种细胞的G1期持续时间变化很大。这可能与细胞在此期增加质量有关。因此,连续增殖细胞的增殖率是受G1期细胞的平均(píngjūn)时间长度控制的,各种细胞群体之间细胞周期的差异取决于G1期的长短。第四页,共七十四页。•(2)此期发生了与DNA合成有关(yǒuguān)的事件,主要是RNA和蛋白质的合成。•(3)RNA合成发生于G1早期,同时RNA聚合酶水平也迅速增高。•(4)G1早期合成结构蛋白和酶蛋白等,G1后期合成与DNA复制有关的酶类,如胸苷激酶、脱氧核苷酸激酶等,其中DNA聚合酶活性在G1末期至S初期增高最快。•(5)蛋白质磷酸化增加。组蛋白磷酸化增加使染色体解旋,以利于DNA复制;非组蛋白磷酸化增加可能与基因的活化有关。•(6)染色体状态由凝集转变为解凝集,为DNA合成创造条件。•(7)细胞膜转运功能增强。第五页,共七十四页。•(二)S期(synthesisphase)•即DNA合成期或复制期,S期主要是DNA合成(自我复制)、遗传物质从二倍体(2n)到四倍体(4n)的整个过程。其中(qízhōng)主要的生物化学改变是遗传物质的复制,即.DNA的复制及组蛋白、非组蛋白等染色体蛋白的合成。•由于每一条染色体复制成两条染色单体,在S期末,DNA含量增加一倍。DNA的准确复制保证了分裂后子细胞遗传物质的平均分配。DNA合成的同时,形成新的染色质的另一重要成分组蛋白的合成也同时进行。第六页,共七十四页。•(三)G2期(Gap2phase)•指DNA复制完成到有丝分裂开始这段时间,这段时间内细胞有2套二倍体染色体,所以(suǒyǐ)又称复制后期或合成后期。DNA复制完成后,细胞进入G2期。处于此期的细胞DNA合成已终止,但仍然进行着RNA和一定的蛋白合成,为细胞有丝分裂作准备。第七页,共七十四页。•(四)M期(mitosisphase)•即有丝分裂期,细胞在M期...