1957年，日本科学家岗田善雄在培养动物细胞时加入失去活性的仙台病毒，发现了细胞融合(rónghé)、产生具有两个核的细胞。后来人们用此方法又成功地诱导了不同种动物的体细胞融合(rónghé)，并且能将杂种细胞培养成活，动物细胞融合(rónghé)技术随之诞生。现在这项技术已经广泛应用于细胞学、遗传学、免疫学、病毒学等多种学科的研究工作中。第一页，共三十七页。细胞(xìbāo)A细胞(xìbāo)B杂种(zázhǒng)细胞灭活的病毒物理法化学法仙台病毒疱疹病毒新城鸡瘟病毒概念：通过诱导两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程称为细胞融合（cellfusion）。如果2个不同的细胞进行融合，则称为细胞杂交（cellhybridization）第二页，共三十七页。融合(rónghé)细胞的类型：同核体（homokaryon）：由同一生物个体的细胞（基因型相同）所融合形成的融合细胞。异核体（heterokaryon）：来自不同基因型的细胞所融合形成的杂交细胞。第三页，共三十七页。1.生物方法（病毒(bìngdú)）病毒是最早采用的融合剂。某些病毒被膜中有融合蛋白（fusionprotein），可介导病毒同宿主细胞融合，也可介导细胞与细胞的融合。常用于诱导动物细胞融合的病毒有仙台病毒、新城鸡瘟病毒、疱疹病毒等。用作融合剂的病毒必须事先灭活（紫外线或β-丙内酯），使病毒的感染活性丧失而保留病毒的融合活性。第二节诱导(yòudǎo)细胞融合的方法第四页，共三十七页。用灭活的病毒诱导(yòudo)ǎ的动物细胞融合过程示意图第五页，共三十七页。仙台病毒是最常用的病毒诱导融合剂。优点：融合率较高、应用广（对各种动物细胞都适宜）、容易培养（可在鸡胚中大量繁殖）。病毒介导融合的缺点：不稳定，在保存(bǎocún)过程中融合活性会降低；制备过程比较烦琐。此外，病毒引进细胞后，可能会对细胞的生命活动产生干扰。第六页，共三十七页。2.化学诱导融合化学融合剂主要有高级脂肪酸衍生物、脂质体、钙离子、水溶性高分子化合物、水溶性蛋白质和多肽，其中最常用的是聚乙二醇（PEG）。PEG可以促使细胞(xìbāo)凝结、破坏互相接触处的细胞(xìbāo)膜的磷脂双分子层，从而使相互接触的细胞(xìbāo)膜之间发生融合，进而细胞(xìbāo)质沟通，形成一个大的双核或多核融合细胞(xìbāo)。第七页，共三十七页。影响PEG诱导融合效果的因素：1.分子量与浓度：分子大、浓度高的PEG，有利于融合，但毒性(dúxìnɡ)也随之增大。一般用分子量PEG1000-4000，40%-60%2.诱导时间：长，...
