动物(dòngwù)细胞培养动物(dòngwù)细胞融合单克隆抗体(kàngtǐ)制备细胞核移植动物细胞工程技术动物细胞工程的基础第一页,共四十二页。动物细胞的培养(péiyǎng)和核移植技术一、动物(dòngwù)细胞培养第二页,共四十二页。(一)、概念(gàiniàn)是指从动物机体内取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些(zhèxiē)细胞生长和增殖。(二)、原理(yuánlǐ)细胞分裂增殖第三页,共四十二页。(三)过程(guòchéng)幼龄动物取动物器官和组织剪碎组织胰蛋白酶处理单个细胞细胞培养第四页,共四十二页。动物胚胎或幼龄(yòulínɡ)动物的组织、器官胰蛋白酶(yídànbáiméi)剪碎单个细胞(xìbāo)加培养液制成细胞悬浮液接触抑制部分细胞“癌变”,无限传代10代细胞原代培养传代培养细胞贴壁剥离、分瓶细胞株细胞细胞系2.动物细胞培养过程:50代细胞(大多死少不死)(大多死少不死)第五页,共四十二页。Double-clicktoaddanObjectDouble-clicktoaddanObjectDouble-clicktoaddanObjectDouble-clicktoaddanObject强调一:细胞(xìbāo)贴壁过程■细胞贴壁:在培养(péiyǎng)瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。■培养瓶或培养皿壁要求:表面(biǎomiàn)光滑、无毒、易于帖附。第六页,共四十二页。Double-clicktoaddanObject■当贴壁细胞分裂生长到表面(biǎomiàn)相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。强调(qiángdiào)二:接触抑制第七页,共四十二页。有关(yǒuguān)概念:•原代培养:从机体取出后立即培养的细胞(xìbāo)为原代细胞(xìbāo)。•传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。第八页,共四十二页。有关(yǒuguān)概念细胞株:原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存活到40~50代,这种传代细胞为细胞株。细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分(bùfen)细胞由于遗传物质的改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代细胞为细胞系。细胞株和细胞系的区别:细胞系的遗传物质改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,容易传代培养。第九页,共四十二页。动物胚胎或幼龄动物的组织(zǔzhī)、器官胰蛋白酶(yídànbáiméi)剪碎单个细胞(xìbāo)加培养液制成细胞悬浮液接触抑制部分细胞“癌变”,无限传代10代...