p31实验四分光(fēnuān)ɡɡ光度技术与葡萄糖氧化酶法测定血糖第一页，共二十四页。一、分光(fēnɡuānɡ)光度法分光(fēnɡuānɡ)光度法是根据不同物质对于不同波长的光波具有选择性吸收的光学特性，建立起来的分析方法。（一）分光(fēnɡuānɡ)光度法的依据第二页，共二十四页。I0It溶液(róngyè)当一定波长的光线通过某种透明介质时，其中一部分光可透过(tòuɡuò)，一部分光被吸收，这种某种溶液对一定波长的光的吸收特性可用于该物质的定性和定量分析。第三页，共二十四页。分光(fēnɡuānɡ)光度计可获得单色光分光光度计利用棱镜或光栅取得(qǔdé)波长范围为几个nm甚至更窄的单色光。第四页，共二十四页。测定的时候需选择不同(bùtónɡ)物质最大吸收峰所对应的波长波长(bōcháng)（nm）光吸收值最大吸收(xīshōu)峰第五页，共二十四页。分光(fēnɡuānɡ)光度计的优点分光光度法的灵敏度、准确度及选择性都很高，是一种最常用的灵敏、精确、快速(kuàisù)和简便的分析方法。第六页，共二十四页。不同分光光度计的波长(bōcháng)范围紫外光(200-400nm)可见光(400-760nm)红外光(760nm-30μm)第七页，共二十四页。（二）分光(fēnɡuānɡ)光度法原理Lambert-beer定律，该定律阐明(chǎnmíng)了溶液对单色光吸收的多少与溶液浓度及液层厚度的乘积成正比关系。I0Itlg=KCL第八页，共二十四页。I0Itlg：光密度（O.D.），或称吸光度(guāngdù)（A）I0：入射光强度(qiángdù)It：透过(tòuɡuò)光强度K：吸光系数，它与该物质吸收光能力有关I0Itlg=KCLC：溶液浓度(mol/L)L：液层厚度(cm)第九页，共二十四页。（三）分光光度法计算待测溶液浓度(nóngdù)的方法1、利用(lìyòng)标准溶液测定溶液的浓度A标=KC标LA样=KC样LA标A样C标C样＝第十页，共二十四页。2、利用标准(biāozhǔn)曲线求得待测溶液的浓度标准曲线的制作：先配制一系列已知不同浓度的测定物标准溶液，按测定管显色(xiǎnsè)，分别读取各管光密度，以各管光密度为纵坐标，各管浓度为横坐标，作图得标准曲线。第十一页，共二十四页。浓度(nóngdù)吸光度以测定管的光密度从标准(biāozhǔn)曲线上可求得测定物浓度第十二页，共二十四页。（四）分光(fēnɡuānɡ)光度计的基本结构1、光源(guāngyuán)2、单色光器3、吸收杯（比色杯）4、检流计（测光系统）第十三页，共二十四页。1）A/T/C/F切换键2）SD键——具2个功能(gōngnéng)。传输数据；确认当前的...
