第三节细菌的生化(shēnɡhuà)鉴定技术生化反应鉴定：通过观察细菌利用酶和降解糖类、醇类、脂类、蛋白质和氨基酸的能力可以了解其生化活性，从而(cóngér)识别和鉴定细菌。一、糖（醇、苷）类发酵(fājiào)试验：原理：各种细菌含有发酵不同糖类(tánlèi)ɡ的酶，分糖类的能力各不相同，且不同细菌分解同一种糖的代谢产物也不一定相同。反应现象结果描述酸性变色、有气泡分解××糖产酸、产气酸性变色、无气泡分解××糖产酸、不产气培养基不变色不分解××糖1．原理：细菌在分解葡萄糖的代谢过程中根据对氧分子参加的需要，分成三种类型：需要分子氧参加的为氧化型；能进行无氧降解的为发酵型，发酵型细菌无论(wúlùn)在有氧或无氧环境中都能分解葡萄糖。在有氧和厌氧环境中都不能分解葡萄糖的细菌为产碱型或不活动型细菌。二．葡萄糖的氧化/发酵(fājiào)试验：2．结果：发酵特征试管颜色不变而氧化特征试管颜色变黄，表明试验(shìyàn)细菌的葡萄糖分解代谢为氧化型；两管颜色均变黄色为发酵型；两支培养管颜色均不变为产碱型或不活动型。O管F管O管F管原理：细菌在糖代谢过程中，分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸进一步分解为甲酸、乙酸、乳酸和琥珀酸等，使培养pH下降至4.5以下时，加入甲基红指示剂呈现红色(hóngsè)。如细菌分解葡萄糖产酸量少，或产生的酸进一步转化为其它物质(如醇、酮、醛、气体和水)，培养基pH在5.4以上，甲基红(MR)试验呈橘黄色。三．甲基红试验(shìyàn)：2．结果(jiēguǒ)：呈现红色者为阳性；橘黄色为阴性；橘红色为弱阳性。MR阴性(yīnxìng)MR阳性某些细菌分解(fēnjiě)葡萄糖后生成丙酮酸，丙酮酸的分解(fēnjiě)产物则因细菌种类不同而有差别，如产气肠杆菌能使丙酮酸脱羧产生中性的乙酰甲基甲醇。乙酰甲基甲醇在碱性溶液中被空气中的氧氧化成二乙酰，在α-奈酚的催化作用下与培养基中氨基酸如精氨酸中的胍基化合物络合形成红色的化合物，即V-P试验阳性。四．V-P试验(shìyàn)：VP阴性(yīnxìng)VP阳性五．β—半乳糖苷酶试验(shìyàn)(ONPG试验)：迟缓分解乳糖的细菌可产生β—半乳糖苷酶，能分解邻硝基酚-β-半乳糖苷(ONPG)而释放出黄色的邻硝基酚。故此(gùcǐ)试验又称为ONPG试验。细菌分解(fēnjiě)乳糖需二种酶半乳糖苷渗透酶β—半乳糖苷六．七叶苷水解(shuǐjiě)试验：1．原理：七叶苷可被细菌水解(shuǐjiě)，生成葡萄糖和七叶素。七叶素与培养基中的枸橼酸铁的二价铁离子反应生成黑...
