第二篇目标产品的分离(fēnlí)与纯化第五章细胞破碎(pòsuì)、蛋白质复性和固液分离第一页，共九十五页。第一页，共九十五页。细胞(xìbāo)破碎固液分离(fēnlí)初级(chūjí)分离(粗)纯化精制下游技术基本过程第二页，共九十五页。第二页，共九十五页。下游加工技术的重要性1.产品分离纯化是最终获得商业(shāngyè)产品的环节。2.投资费用高（抗生素、乙醇、柠檬酸占60%）。3.分离纯化技术落后会阻碍发酵工程技术的发展。第三页，共九十五页。第三页，共九十五页。几种产品(chǎnpǐn)在发酵液中的浓度产品典型浓度（g/L）抗生素25氨基酸100酒精100有机酸100酶20蛋白质10第四页，共九十五页。第四页，共九十五页。下游加工技术的特点1.发酵液的复杂性造成分离上的困难性。2.欲提取的产物通常浓度低且很不稳定(wěndìng)。3.多为分批操作，各批发酵液不尽相同，要求下游加工有一定弹性。第五页，共九十五页。第五页，共九十五页。•产物提纯过程的不同决定于：对象材料(cáiliào)、目标产物特性及对其纯度的要求第一节概述(ɡàishù)第六页，共九十五页。第六页，共九十五页。基因工程生物制品(shēnɡwùzhìpǐn)分离纯化:工程菌经过(jīngguò)大规模培养后，产生的有效成分含量很低，杂质含量却很高分离(fēnlí)纯化极其重要基因工程药物从转化细胞、生产，对产品的纯度要求高于传统产品。第七页，共九十五页。第七页，共九十五页。发酵液细胞分离胞内产物胞外产物细胞破碎固液分离包涵体细胞碎片分离变性复性浓缩初步分离高度纯化制剂基因工程制品分离(fēnlí)纯化的一般流程第八页，共九十五页。第八页，共九十五页。•初级分离：分离细胞和培养液，破碎细胞释放产物，溶解(róngjiě)包含体（包涵体），复原蛋白质，浓缩产物，去除大部分杂质等过程。主要决定产物的得率。•纯化精制：初级分离基础上，用各种高选择性手段，主要是各种层析技术，将目标产物和干扰杂质尽可能分开，使产物的纯度达到有关要求。主要决定产物的纯度。产物(chǎnwù)提纯过程包括两个基本阶段：第九页，共九十五页。第九页，共九十五页。第二节细胞(xìbāo)破碎•目的：释放细胞内含物。•分类：按照是否存在(cúnzài)外加作用力分为机械法和非机械法。问题(wèntí)：破碎率是否越高越好？以大肠杆菌为宿主药物多为胞内产物第十页，共九十五页。第十页，共九十五页。细胞(xìbāo)破碎方法分类图第十一页，共九十五页。第十一页，共九十...
