(ò)第一页，共二十八页。(jīběn)(jīběn)1.1.无菌环境：无菌环境：细胞培养间消毒细胞培养间消毒aa：使用前紫外照射：使用前紫外照射(zhàoshè)(zhàoshè)20-3020-30分钟分钟bb：使用完：使用完75%75%酒精擦拭台面，紫外照射酒精擦拭台面，紫外照射1515分钟。分钟。cc：每两周用：每两周用8484消毒液擦拭地面、台面一次的方式进行消毒消毒液擦拭地面、台面一次的方式进行消毒第二页，共二十八页。超净工作台：超净工作台：使用前使用前开启柜内紫外灯照射开启柜内紫外灯照射1515－－3030分钟分钟使用时使用时开启鼓风，在台面内操作开启鼓风，在台面内操作使用完毕后使用完毕后要用要用75%75%酒精将台面和台内四周酒精将台面和台内四周(sìzhōu)(sìzhōu)擦拭干净，紫外照射擦拭干净，紫外照射1010分钟。分钟。第三页，共二十八页。COCO2培养箱：培养箱：1.1.设定的条件为设定的条件为37℃37℃，，55％％CO2CO2。。2.2.使用使用CO2CO2培养箱应注意的问题：培养箱应注意的问题：▫▫用螺旋口瓶培养细胞时，需将瓶盖微松，以保证通气。用螺旋口瓶培养细胞时，需将瓶盖微松，以保证通气。▫▫保持培养箱内空气干净，定期消毒擦拭。保持培养箱内空气干净，定期消毒擦拭。▫▫箱内蒸馏水槽中定期更换灭菌箱内蒸馏水槽中定期更换灭菌(mièjūn)(mièjūn)蒸馏水蒸馏水30003000毫升，以保持箱内湿度。毫升，以保持箱内湿度。第四页，共二十八页。控制水盘内污染的方法：控制水盘内污染的方法：11、定期、定期((至少每两周一次至少每两周一次))，更换水盘内的无菌蒸馏水或无菌去离子水。，更换水盘内的无菌蒸馏水或无菌去离子水。22、在水盘内添加适量硫酸铜，预防真菌、在水盘内添加适量硫酸铜，预防真菌(zhēnjūn)(zhēnjūn)污染。配制方法：污染。配制方法：20g20g无水硫酸铜＋无水硫酸铜＋5ml5ml浓浓硫酸＋硫酸＋1L1L灭菌纯水。灭菌纯水。33、水盘内添加适量抗生素。、水盘内添加适量抗生素。44、定期为培养箱（含水盘）进行一次高温灭菌。、定期为培养箱（含水盘）进行一次高温灭菌。第五页，共二十八页。2.2.细胞培养条件细胞培养条件(tiáojiàn)(tiáojiàn)细胞培养器皿：细胞培养器皿：细胞培养瓶：细胞培养瓶：▫▫2525平方厘米（加液量平方厘米（加液量3-5ml3-5ml））▫▫7575平方厘米（加液量平方厘米（加液量10-15ml10-15ml））▫▫150150平方厘米（加液量平方厘米（加液量40ml40ml））细胞培养板：细胞培养板：第六页，共二十八页...
