流式细胞术Flowcytometry,FCM第一页,共六十六页。第一页,共六十六页。1.流式细胞仪(FlowCytometer):是现代物理电子技术、激光技术、计算机技术于一体的先进科学技术设备。2.流式细胞术(FlowCytometry):利用流式细胞仪对处于快速直线流动状态中的单列细胞或生物颗粒进行逐个(zhúgè)、多参数、快速的定性、定量分析或分选的技术。基本概念基本概念第二页,共六十六页。第二页,共六十六页。第一节第一节流式细胞仪基本结构与原理流式细胞仪基本结构与原理第二节流式细胞术的数据分析第二节流式细胞术的数据分析第三节第三节流式细胞仪分析的技术要求流式细胞仪分析的技术要求(yāoqiú)(yāoqiú)第四节流式细胞术的应用第四节流式细胞术的应用第三页,共六十六页。第三页,共六十六页。一、一、流式细胞仪基本结构流式细胞仪基本结构(jiégòu)(jiégòu)与功能与功能二、流式细胞术的重要术语二、流式细胞术的重要术语三、三、流式细胞术基本原理流式细胞术基本原理四、四、流式细胞术的样本设置流式细胞术的样本设置第一节流式细胞仪基本第一节流式细胞仪基本(jīběn)(jīběn)结构与原理结构与原理第四页,共六十六页。第四页,共六十六页。四、流式细胞术的样本(yàngběn)设置1.常用对照阴性对照阳性(yángxìng)对照空白对照补偿对照2.一套完整的流式细胞术检测样本设置第五页,共六十六页。第五页,共六十六页。阴性(yīnxìng)对照作用是调节各荧光探测器合适的放大倍数,将仪器归零,即确定待测标本的基础荧光域值免疫球蛋白同型对照(同型抗体为没有(méiyǒu)特异性、与荧光抗体蛋白亚型一致的免疫球蛋白。反映待测标本对抗体非特异性结合的水平)阴性细胞对照(用已知不表达某种抗原的细胞进行平行实验,通常用于确定抗体的特异性)第六页,共六十六页。第六页,共六十六页。阳性(yángxìng)对照即用已知表达某种抗原的细胞(xìbāo)(阳性细胞(xìbāo))细胞(xìbāo)进行平行实验,通常用于检测抗体是否有问题或确定实验方法的稳定性、准确性。第七页,共六十六页。第七页,共六十六页。空白对照即不进行标记的细胞。有些细胞内物质会同样被激发(jīfā)而产生自发荧光。空白对照的主要作用用于确定待测标本的基础荧光域值或检测染色方法是否成功。第八页,共六十六页。第八页,共六十六页。补偿(bǔcháng)对照由于光谱的重叠(chóngdié),对于多色分析样本必须设置补偿对照。补偿对照主要用于多色分析时荧...