论著·基础研究▲基金项目：河南省医学科技攻关计划项目（２０１８０２０９０２）作者简介：王琛琛，硕士，主管技师，研究方向：干细胞修复。通信作者：亓民，博士，主任医师，研究方向：老年代谢和干细胞修复。骨髓间充质干细胞对氧化应激损伤心肌细胞凋亡、自噬的影响▲王琛琛１，２郭彩茹２牛宇杰２王皓３续畅４亓民２［１首都医科大学附属北京世纪坛医院临床基因与细胞工程中心，北京市１０００３８；２河南省肿瘤免疫与再生医学国际联合实验室（郑州大学附属洛阳中心医院），河南省洛阳市４７１００９；３洛阳市心脑组织损伤与修复重点实验室，河南省洛阳市４７１００９；４首都医科大学附属北京世纪坛医院药物及医疗器械临床试验机构，北京市１０００３８］【摘要】目的探讨骨髓间充质干细胞（ＢＭＳＣ）对氧化应激损伤心肌细胞凋亡、自噬的影响。方法（１）以不同浓度（０μｍｏｌ／Ｌ、５０μｍｏｌ／Ｌ、１００μｍｏｌ／Ｌ、３００μｍｏｌ／Ｌ、５００μｍｏｌ／Ｌ和７００μｍｏｌ／Ｌ）Ｈ２Ｏ２处理大鼠心肌细胞Ｈ９ｃ２６ｈ、９ｈ和１２ｈ，采用ＣＣＫ⁃８检测细胞活力，筛选Ｈ２Ｏ２的最佳作用浓度及作用时间以构建氧化应激损伤心肌细胞模型。（２）将大鼠心肌细胞Ｈ９ｃ２分为对照组、Ｈ２Ｏ２组、ＢＭＳＣ＋Ｈ２Ｏ２组。Ｈ２Ｏ２组和ＢＭＳＣ＋Ｈ２Ｏ２组均采用５００μｍｏｌ／ＬＨ２Ｏ２诱导１２ｈ建立氧化应激损伤心肌细胞模型，在此基础上，ＢＭＳＣ＋Ｈ２Ｏ２组加入对数生长期大鼠ＢＭＳＣ进行共培养。对照组正常培养而不给予干预。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况，分别采用实时荧光定量ＰＣＲ、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测各组细胞自噬相关基因［Ｂｅｃｌｉｎ⁃１、微管相关蛋白１轻链３β（ＬＣ３Ｂ）］ｍＲＮＡ和蛋白表达水平。结果与对照组相比，Ｈ２Ｏ２组细胞凋亡率升高（Ｐ＜０．０５）；与Ｈ２Ｏ２组相比，ＢＭＳＣ＋Ｈ２Ｏ２组细胞凋亡率降低（Ｐ＜０．０５）。与对照组、Ｈ２Ｏ２组比较，Ｈ２Ｏ２＋ＢＭＳＣ组Ｂｅｃｌｉｎ⁃１、ＬＣ３ＢｍＲＮＡ和蛋白表达水平均升高（均Ｐ＜０．０５）。结论ＢＭＳＣ可以通过抑制心肌细胞凋亡及增强心肌细胞自噬水平，以减轻氧化应激对心肌细胞的损伤，从而发挥心肌保护作用。【关键词】氧化应激损伤；骨髓间充质干细胞；心肌细胞；自噬；凋亡【中图分类号】Ｒ３２９．４１；Ｒ３４９．１【文献标识码】Ａ【文章编号】０２５３⁃４３０４（２０２３）０５⁃０５６１⁃０６...
