食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定 GB 4789.2-2010.pdf

GB4789.2-2010食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定1范围本标准规定了食品中菌落总数(aerobic plate count)的测定方法。本标准适用于食品中菌落总数的测定。2术语和定义2.1菌落总数aerobic plate count食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。3设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：3.1恒温培养箱：361C,30C土1。3.2冰箱：25。3.3恒温水浴箱：46土1。3.4天平：感量为0.1g。3.5均质器，3.6振荡器。3.7无菌吸管：1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头。3.8无菌锥形瓶：容量250mL、500mL,3.9无有培养皿l:直径90mm。3.10pH计或pH比色管或精密pH试纸。3.11放大镜或/和荫落计数器。4培养基和试剂4.1平板计数琼脂培养基：见附录A中A,1。4.2磷酸盐级冲液：见附求A中A.2。4.3无菌生理盐水：见附录A中A.3。5检验程序菌落总数的检验程序见图1。GB4789.2-20106.2培养6.2.1待琼脂凝固后，将平板翻转，36C士1C培养48h士2h,水产品30C士1C培养72h土3h。6.2.2如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基（约4mL),凝固后翻转平板，按6.2.1条件进行培养。6.3菌落计数可用肉眼规察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位(colony-forming units,CFU)表示。6.3.1选取菌落数在30CFU300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30CFU的平板记录具体菌落数，大于300CFU的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。6.3.2其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2,代表一个平板菌落数。6.3.3当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时，则将每条单链作为一个菌落计数。7结果与报告7.1菌落总数的计算方法7.1.1若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每g(L)样品中菌落总数结果。7.1,2若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按式(1)计算N=C/(m+0.1e)d式中N一样品中菌落数；C一平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和：一第一稀释度（低稀释倍数）平板个数：一第二稀释度（高稀释倍数）平板个数：d一稀释因子（第一稀释度）。示例：稀释度1：100(第一稀释度)11000(第二稀释度)菌落数(CFU)232,24433.35N=C/(m1+0.1m2)d支识-品-247m544上述数据按7.2.2数字修约后，表示为25000或2.510。7.1.3若所有稀释度的平板上菌落数均大于300CU,则对稀释度最高的平板进行计数，其他平板可记录为多不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。7.1.4若所有稀释度的平板菌落数均小于30CFU,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。7.1.5若所有稀释度（包括液体样品原液）平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数计算。7.1.6若所有稀释度的平板菌落数均不在30CFU300CFU之间，其中一部分小于30CFU或大于300CFU时，则以最接近30CFU或300CFU的平均菌落数乘以稀释倍数计算。7.2菌落总数的报告7.2.1菌落数小于100CFU时，按“四舍五人”原则修约，以整数报告。