第一页,共五十一页。基因工程(jīyīngōngchéng)背景(bèijǐng):家蚕能够吐出蚕丝为人类利用。但繁殖慢,产量低。能否让大肠杆菌(dàchánɡɡǎnjūn)也能吐蚕丝呢?大肠杆菌繁殖很快,但不会产丝。第二页,共五十一页。•用人工方法,把甲生物的某个基因提取出来,在体外进行切割、拼接和重组,然后将其导入乙生物的细胞内进行大量复制,并进行表达,从而定向地改变(gǎibiàn)乙生物的遗传性状,或获得人类所需要的基因产物(蛋白质、多肽、酶)。剪切拼接(pīnjiē)导入甲生物(shēngwù)取出所需基因生物新类型表达新的生物产品乙生物第三页,共五十一页。基因的大小以纳米计算,要对它进行剪切、拼接(pīnjiē)等操作,没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具:1、基因(jīyīn)的手术刀2、基因(jīyīn)的针线3、基因的运输工具第四页,共五十一页。主要(zhǔyào)在原核生物中。特异性。即一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切割点上将DNA分子(fēnzǐ)切断(使连接脱氧核苷酸的磷酸二酯键断裂)。已发现(fāxiàn)数千种种类:来源:特点:1、基因的剪刀──限制性核酸内切酶第五页,共五十一页。例如例如(lìrú)(lìrú):大肠杆菌的一种限制酶能识别:大肠杆菌的一种限制酶能识别GAATTCGAATTC序列,并在序列,并在GG和和AA之间切开。之间切开。限限制制((xiànzhìxiànzhì))酶酶第六页,共五十一页。GAATTCGAATTCCTTAAGCTTAAG5′5′5′5′3′3′3′3′粘性(zhānxìnɡ)末端粘性(zhānxìnɡ)末端限制性限制性内切酶内切酶CTTAACTTAAGG5′5′3′3′AATTCAATTCGG3′3′5′5′被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们两个之间正好反向互补配对,这样的切口叫粘性(zhānxìnɡ)末端。被同一种限制酶切断的几个DNA就具有相同的粘性末端,能够通过互补进行配对。第七页,共五十一页。TGCATGCAACGTACGT5′5′3′3′3′3′5′5′不同的限制(xiànzhì)酶所形成的粘性末端不同ACGACGTT5′5′3′3′GCAGCATT3′3′5′5′另一种另一种限制酶限制酶第八页,共五十一页。2、基因(jīyīn)的针线作用作用(zuòy(zuòyòng)òng)::将粘性末端碱基互补的两个(liǎnɡɡè)DNA片段连接起来,使之成为一个完整的DNA分子(使两个DNA片段通过磷酸二酯键连接成一个DNA分子)。──DNA连接酶第九页,共五十一页。CTTAACTTAAGGAATTCAATTCGG连接酶连接酶第十页,共五十一页。3...