实验二土壤微生物的别离纯化与鉴定第一页，共三十六页。一、目的要求1.通过从土壤中别离纯化细菌，掌握培养基的制备与灭菌技术、微生物的别离纯化方法和无菌操作技术。2.掌握微生物的鉴定技术第二页，共三十六页。第一局部培养基的配制与灭菌第三页，共三十六页。一、实验目的1.学习配制培养基的原理，并掌握配制培养基的一般方法和步骤。2.学习几种常用培养基的配制、分装和灭菌的操作方法.3.进一步熟练掌握高压蒸汽灭菌锅的使用方法。第四页，共三十六页。二、实验原理〔1〕培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质，用以培养、别离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。在自然界中，微生物种类繁多，营养类型多样，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多。但是，不同种类的培养基中，一般应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐、生长因素等。不同微生物对pH要求不一样，霉菌和酵母的培养基的pH一般是偏酸性的，而细菌和放线菌的培养基的pH一般为中性或微碱性的(嗜碱细菌和嗜酸细菌例外)。所以配制培养基时，都要根据不同微生物的要求将培养基的pH调到适宜的范围。此外，由于配制培养的各类营养物质和容器等含有各种微生物，因此，已配制好的培养基必须立即灭菌，如果来不及灭菌，应暂存冰箱内，以防止其中的微生物生长繁殖而消耗养分和改变培养的酸碱度所带来不利的影响。第五页，共三十六页。二、实验原理〔2〕根据微生物的种类和实验目的不同，培养基的类别如下：按成分的不同：天然培养基、合成培养基和半合成培养基。按培养基的物理状态分：固体培养基、半固体培养基和液体培养基。按培养基的用途分：根底培养基、营养培养基〔加富培养基〕、鉴别培养基和选择培养基。第六页，共三十六页。二、实验原理〔3〕目前已有各种商品化的“枯燥培养基〞成品出售。这种培养基是将新鲜配制的液体培养基用喷雾枯燥法、真空枯燥法、低温枯燥法或蒸发枯燥法等将培养基内所含的水分去掉；或将培养基内的各种固形成分，经适当处理、充分混匀，便成枯燥粉末而成。使用时只要按比例参加一定量的水，经溶解、分装，高压蒸气灭菌，即可使用。这种培养基的优点是配制省时，携带方便，使用简易，质量稳定。第七页，共三十六页。三、实验器材1.药品及试剂：根据所要制备的培养基准备所需试剂。2.仪器及其它：试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻棒、天平、药匙、高压蒸汽灭菌锅、pH试纸(5.5-9.0)、棉花、牛...
