课题2土壤中分解尿素的细菌的别离与计数专题2微生物的培养与应用第一页，共五十一页。一、课题背景1、尿素的利用尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。2、细菌利用尿素的原因土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶CO(NH2)2脲酶+H2O+CO2NH3第二页，共五十一页。3、常见的分解尿素的微生物芽孢杆菌、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌、棒状杆菌、梭状芽孢杆菌，某些真菌和放线菌。4、课题目的①从土壤中别离出能够分解尿素的细菌②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌一.研究思路㈠.筛选菌株㈡.统计菌落数目㈢.设置对照第三页，共五十一页。1、实例：启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。原因：因为热泉温度70～800C，淘汰了绝大多数微生物只有Taq细菌被筛选出来。DNA多聚酶链式反响是一种在体外将少量DNA大量复制的技术，此项技术要求使用耐高温〔930C〕的DNA聚合酶。第四页，共五十一页。要别离一种微生物，必须根据该微生物的特点，包括营养、生理、生长条件等；方法：⑴抑制大多数微生物不能生长⑵造成有利于该菌生长的环境结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过平板稀释等方法对它进行纯化培养别离。2、实验室中微生物的筛选原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。第五页，共五十一页。15.0g琼脂1.0g尿素10.0g葡萄糖0.2gMgSO4`7H2O2.1gNaH2PO41.4gKH2PO43、土壤中分解尿素的细菌的别离与计数所需培养基：①从物理性质看此培养基属于哪类？固体培养基第六页，共五十一页。②在此培养基中哪些作为碳源、氮源？碳源：葡萄糖、尿素氮源：尿素〖思考2〗该培养基对微生物〔具有，不具有〕选择作用。如果具有，其选择机制是。具有只有能够以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基上生长第七页，共五十一页。培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。4、培养基选择分解尿素的微生物的原理第八页，共五十一页。1、显微镜直接计数：利用血球计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。〔二〕.统计菌落数目：不能区分死菌与活菌；不适于对运动细菌的计数；需要相对高的细菌浓度；个体小的细菌在显微镜下难以观...
