基金项目:四川省科技厅重点研发项目(2019YFS0265)作者简介:李世伟，男，1988－05生，硕士，主治医师，E-mail:lswlsh@163．com收稿日期:2022－11－10不同途径注射质粒微泡对超声微泡破碎技术介导EGFP基因在兔骨缺损处转染的影响李世伟，杨晓东，唐学阳*(四川大学华西医院小儿外科，成都610041;*通讯作者，E-mail:tangxueyang100@163．com)摘要:目的探讨超声微泡破碎技术介导增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein，EGFP)基因在兔骨缺损处转染时，不同途径注射质粒微泡混悬液对转染效率及局部组织的影响。方法3月龄新西兰大白兔10只，制备右尺骨骨缺损模型，按照随机数字表法分为静脉组和断端间组(n=5)。静脉组和断端间组造模后第10天分别经耳缘静脉或骨缺损断端间向兔体内注射携带EGFP基因的质粒微泡混悬液(0．3ml/kg)。在超声频率1MHz，超声强度1．0W/cm2，占空比20%条件下，对两组骨缺损部位超声辐照1min，进行EGFP基因转染。在基因转染后1周时处死兔，于骨缺损处获取标本制作切片，荧光染色观察各组EGFP表达情况。采用病理图像分析软件分析计算平均光密度。HE染色观察断端间软组织病理特点。结果静脉组和断端间组均观察到绿色荧光蛋白表达。断端间组平均光密度高于静脉组，差异有统计学意义(0．0345±0．0028vs0．0004±0．0001，P＜0．05)。表达绿色荧光蛋白的细胞主要为骨骼肌细胞，各组未见细胞坏死征象。结论超声微泡破碎技术介导EGFP基因在兔骨缺损处转染时，其效率受不同途径注射质粒微泡混悬液的影响，骨缺损断端间直接注射优于静脉注射。关键词:超声微泡破碎技术;增强型绿色荧光蛋白;基因治疗;骨缺损;新西兰大白兔中图分类号:Ｒ683文献标志码:A文章编号:1007－6611(2023)04－0493－05DOI:10．13753/j．issn．1007－6611．2023．04．012Effectofdifferentinjectionroutesofplasmid-microbubblesuspensiononEGFPgenetransfectioninbonedefectusingultra-sound-mediatedmicrobubbledestructionLIShiwei，YANGXiaodong，TANGXueyang*(DepartmentofPediatricSurgery，WestChinaHospital，SichuanUniversity，Chengdu610041，China;*Correspondingauthor，E-mail:tangxueyang100@163．com)Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectofdifferentinjectionroutesofplasmid-microbubblesuspensiononenhancedgreenfluorescenceprotein(EGFP)genetransfectionintissuebetweenbonedefectsbyultrasound-mediatedmicrobubbledestruction...
