第52卷第3期2023年3月Vol.52No.3Mar.2023化工技术与开发Technology&DevelopmentofChemicalIndustry基于光谱法研究汞荧光分子探针与人血清白蛋白的相互作用陈昕1,刘元艳2,马明硕3,陈杰3,刘治刚3,曾晓丹3(1.吉林化工学院研究生学院,吉林吉林132022;2.吉林石化公司质量检验中心,吉林吉林132022;3.吉林化工学院分析测试中心,吉林吉林132022)摘要:采用荧光光谱技术,研究了不同温度下用于识别汞的荧光分子探针(WL-6)与生物大分子人血清白蛋白(HSA)的结合机理。结果表明,HSA在结合位点的荧光强度,随着WL-6的浓度增加而显著降低。根据荧光数据,得到了WL-6与HSA作用的结合常数、主要作用力及猝灭常数。从紫外吸收光谱、荧光光谱、同步荧光、三维荧光光谱和圆二色谱的结果可以看出,WL-6的结合改变了HSA的构象。关键词:荧光探针;人血清白蛋白;结合常数中图分类号:TQ422+.4文献标识码:A文章编号:1671-9905(2023)03-0001-06基金项目:吉林省科技厅项目(20220203020SF);国家自然科学基金项目(51902125)通信联系人:曾晓丹,女,副教授,研究方向:荧光分子探针的设计合成与应用研究。E-mail:1550309926@qq.com收稿日期:2022-09-26研究与开发血清白蛋白是生物体血浆中含量最多的蛋白质,在生物体中的作用,是与进入生物体的小分子物质结合,并将小分子物质运输到体内的相应位置,从而发挥小分子物质的作用,因此经常被用作小分子物质的靶标物质[1]。萘酰亚胺类化合物具有优异的光化学稳定性和热稳定性,常作为荧光材料,广泛应用于医药[2]、太阳能电池[3]、荧光探针[4-6]等领域。本文设计并合成了一种基于萘酰亚胺的荧光探针(图1),用于测定Hg2+[7]。通过体外模拟生理条件,利用荧光光谱,研究了探针WL-6与HSA的相互作用,探讨了探针与HSA相互作用的荧光猝灭机理,得到了探针与HSA的结合位点、结合常数和热力学参数,并依据紫外吸收光谱、荧光光谱、同步荧光光谱、三维荧光光谱和圆二色谱的数据,研究了探针的结合对HSA结构的影响,得到此类探针与蛋白质分子的作用规律的数据,从而对此类探针的设计以及作用机理提供科学依据。同时,可以依据小探针分子和蛋白质的结合类型、结合强度和生理效应等,设计出具有高灵敏度、高选择性的探针。OONOOS图1探针WL-6的化学结构式1实验部分1.1材料99%HSA:浓度10-5mol·L-1,加入蒸馏水配制而成。探针WL-6母液:浓度10-3mol·L-1,用三氯甲烷配制。Tris缓冲溶液:pH=7.4,浓度10-2mol·L-1...